原代細(xì)胞的培養(yǎng)：
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng)，是建立細(xì)胞系的步，是一項(xiàng)基本技術(shù)。
原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長(zhǎng)特性，適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
大鼠胎盤(pán)間充質(zhì)干細(xì)胞
商品屬性：
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組織來(lái)源
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胎盤(pán)組織
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細(xì)胞分類(lèi)
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大鼠原代細(xì)胞
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培養(yǎng)條件
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氣相：空氣，95%；CO2，5%
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生長(zhǎng)特性
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貼壁
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細(xì)胞形態(tài)
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成纖維細(xì)胞樣
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細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠胎盤(pán)間充質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞分離自胎盤(pán)組織；胎盤(pán)（placenta）是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體內(nèi)膜聯(lián)合長(zhǎng)成的母子間交換物質(zhì)的過(guò)渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在中發(fā)育，依靠胎盤(pán)從母體取得營(yíng)養(yǎng)，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤(pán)還產(chǎn)生多種維持妊娠的，是一個(gè)重要的器官。有些爬行類(lèi)和魚(yú)類(lèi)也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長(zhǎng)出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤(pán)。胎盤(pán)間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cell，MSC）是一種多能干細(xì)胞，是具有自我復(fù)制能力的多潛能細(xì)胞。在一定條件下，它可以分化成多種功能細(xì)胞像APSC多能細(xì)胞。在胚胎發(fā)育中來(lái)源于中胚層。在機(jī)體正常的組織損傷修復(fù)過(guò)程中，MSC是一種重要的參與組織再生的細(xì)胞庫(kù)。在組織損傷引起的特殊信號(hào)作用下，MSC遷移到受損部位，在局部聚集增殖，依據(jù)不同的損傷信號(hào)沿著不同途徑分化。MSC易于分離擴(kuò)增，體外倍增能力旺盛，能保持其多向分化能力。因此，MSC是一種實(shí)用的組織修復(fù)種子細(xì)胞。相較于其他干細(xì)胞，胎盤(pán)間充質(zhì)干細(xì)胞具有來(lái)源方便，細(xì)胞數(shù)量充足，易于分離、培養(yǎng)、擴(kuò)增和純化，傳代擴(kuò)增多代后仍具有干細(xì)胞特性。胎盤(pán)是干細(xì)胞的佳來(lái)源。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胎盤(pán)間充質(zhì)干細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胎盤(pán)間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)CD90熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
公司正在出售的產(chǎn)品：
Hsp-20ELISAKit
大鼠白介素27(IL-27)elisa分析檢測(cè)試劑盒
IL-27 ELISA Kit
人肌酸激酶工酶BB(CK-BB)elisa分析檢測(cè)試劑盒
CK-BBELISAkit
T細(xì)胞活化連接蛋白抗體 Anti-LAT
Rap鳥(niǎo)嘌呤核苷酸交換因子(GEF)5抗體 Anti-RAPGEF5/Repac
核小體結(jié)合蛋白1抗體 Anti-NSBP1
囊泡乙酰膽堿通道抗體 Anti-VAT
魚(yú)紅細(xì)胞**素(EPO)elisa分析檢測(cè)試劑盒
EPO ELISA kit
人補(bǔ)體蛋白3(C3)elisa分析檢測(cè)試劑盒
C3ELISAKit
小鼠二肽基肽酶4(DPP4/CD26)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素-9（IL-9）elisa檢測(cè)試劑盒
三色（MGT） 染色試劑盒
人β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)elisa檢測(cè)試劑盒
DNA結(jié)合蛋白κB抗體
NFRKB
7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框43抗體
C7ORF43
羥化酶抗體 Anti-Tyrosine Hydroxylase(Neuronal
Marker)/Tyk2/TYH
蛋白磷酸酶γ1抗體 Anti-PP1C gamma
雞卵白蛋白/卵清蛋白抗體 Anti-OVA/SerpinB8
受體3抗體 Anti-SSTR3
Cy5.5標(biāo)記的兔抗羊IgG H&L
大鼠胎盤(pán)間充質(zhì)干細(xì)胞MCCC1蛋白抗體
MCCC1
19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框48抗體
C19orf48
原代細(xì)胞的分離方法：
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡(jiǎn)單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
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