原代細(xì)胞的培養(yǎng)：
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng)，是建立細(xì)胞系的步，是一項(xiàng)基本技術(shù)。
原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長特性，適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞
商品屬性：
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組織來源
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視網(wǎng)膜組織
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細(xì)胞分類
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大鼠原代細(xì)胞
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培養(yǎng)條件
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氣相：空氣，95%；CO2，5%
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生長特性
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貼壁
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細(xì)胞形態(tài)
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神經(jīng)元細(xì)胞樣
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細(xì)胞簡介：
大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞分離自視網(wǎng)膜組織；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連，由色素上皮細(xì)胞組成，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內(nèi)分別為：色素上皮層、視錐、視桿細(xì)胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個(gè)神經(jīng)元組成。神經(jīng)元是視細(xì)胞層，專司感光，它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上，而視錐細(xì)胞則在中心凹處多。層叫雙節(jié)細(xì)胞，約有10到數(shù)百個(gè)視細(xì)胞通過雙節(jié)細(xì)胞與一個(gè)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系，負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細(xì)胞層，專管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動(dòng)的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區(qū)，其分辨能力強(qiáng)。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞貼壁后呈單層排列，部分細(xì)胞聚集成團(tuán)，細(xì)胞呈圓形或橢圓形，核圓且相對(duì)透明，有些細(xì)胞膜上伸出短而小的突起；該細(xì)胞為高度分化細(xì)胞，在體外屬于不增殖群。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞是青光眼病理性損害的主要細(xì)胞，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的死亡可導(dǎo)致視功能不可逆損傷，研究視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞損害的細(xì)胞學(xué)和分子生物學(xué)機(jī)制有利于青光眼發(fā)病機(jī)制的研究。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法，結(jié)合視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)和化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞經(jīng)CD90熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠肌球蛋白重鏈(MHC)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測
豚鼠白介素10(IL10)elisa檢測試劑盒
通用型性葉枯病（Xanthomonas；Xan）基因檢測試劑盒
β-半乳糖苷酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒
大鼠組織蛋白酶K(cath-K)elisa檢測試劑盒
上皮鈉通道β抗體 Anti-SCNN1B/βENaC
Rad52抗體 Anti-Rad52
P53誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡抑制蛋白抗體 Anti-NME5/IPIA beta
鋅指蛋白744抗體 Anti-ANKZF1/ZNF744
周期素依賴性激酶5重組兔單克隆抗體 Cdk5
轉(zhuǎn)錄延伸因子B2抗體 Elongin B
骨保護(hù)蛋白配體/破骨細(xì)胞分化因子抗體 RANKL/CD254
含SH2結(jié)構(gòu)域蛋白D5抗體 SH2D5
MONDOA蛋白抗體 MONDOA
NEC1抗體 PCSK1/NEC1
溶質(zhì)載體家族蛋白10成員A6抗體 SLC10A6
軟骨中間層蛋白CILP2抗體 CILP2
cGMP依賴性蛋白激酶1抗體 cGKI
DHX40蛋白抗體 DHX40
磷酸化p38MAPK抗體 phospho-P38 MAPK (Thr180)
磷酸化蛋白磷酸酶1C抗體 phospho-PTPN6 (Tyr536)
白細(xì)胞介素36γ抗體 IL36 gamma
鼻咽癌細(xì)胞相關(guān)基因6抗體 C9orf127
線蟲GAPDH（內(nèi)參）抗體
鋅指蛋白231抗體 Bassoon
大鼠磷脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(PLTP)elisa檢測試劑盒
大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞人AT豐富結(jié)合域1A(ARID1A)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測
血液3－羥－3－甲戊二酰（HMG－COA）還原酶活性直接比色法
小鼠跨膜蛋白97(TMEM97/MAC30)elisa檢測試劑盒
大鼠肥大細(xì)胞類胰蛋白酶(MCT)elisa檢測試劑盒
原代細(xì)胞的分離方法：
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長。
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