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產(chǎn)品資料

HotStart RAPA3G DNA Polymerase(10U/ul,無(wú)甘油)

HotStart RAPA3G DNA Polymerase(10U/ul,無(wú)甘油)
  • 如果您對(duì)該產(chǎn)品感興趣的話,可以
  • 產(chǎn)品名稱(chēng):HotStart RAPA3G DNA Polymerase(10U/ul,無(wú)甘油)
  • 產(chǎn)品型號(hào):A-PJ1040
  • 產(chǎn)品展商:撫生
  • 產(chǎn)品文檔:無(wú)相關(guān)文檔
簡(jiǎn)單介紹
HotStart RAPA3G DNA Polymerase(10U/ul,無(wú)甘油)公司正在出售的產(chǎn)品:M-MLV 4 Two-Step RT-PCR Kit逆轉(zhuǎn)錄兩步法通用試劑盒
產(chǎn)品描述


商品屬性:


貨號(hào)

規(guī)格

產(chǎn)品名稱(chēng)

A-PJ1040-1000U

1000U

HotStart RAPA3G DNA Polymerase(10U/ul,無(wú)甘油)

儲(chǔ)存條件:


HotStart RAPA3G DNA Polymerase(10U/ul,無(wú)甘油)儲(chǔ)存:-20℃ 可保存 3 年。

產(chǎn)品介紹:


末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)是一種不依賴(lài)于模板的 DNA 聚 合酶,催化脫氧核苷酸結(jié)合到 DNA 分子的 3’羥基端。帶有 突出、凹陷或平滑末端的單雙鏈 DNA 分子均可作為 TdT 的 底物,加尾長(zhǎng)度可達(dá) 5~300nt。本酶經(jīng)電子重構(gòu)架技術(shù)篩選, 使其可以在 45°C 高溫下反應(yīng),從而避免因 DNA 二級(jí)結(jié)構(gòu)造 成的加尾效率下降。 該酶廣泛用于 DNA 的 3’末端添加同聚物、利用修飾堿 基(如 ddNTP,DIGdUTP)標(biāo)記 DNA 3’末端、TdT 介導(dǎo)的 dUTP 缺口末端標(biāo)記技術(shù)(細(xì)胞凋亡的原位檢測(cè))等試驗(yàn)。
活性定義:37 ℃ 60 分鐘內(nèi),催化 1nmol dNTP 加入到多聚核苷酸 3’羥基末端中所需的酶量定義為 1 個(gè)活性單位
熱失活:75°C 20min。

 

注意事項(xiàng):


1、適量 EDTA 可使 Terminal Transferase 的活性喪失。
2、金屬離子螯合劑,較高濃度的銨根離子、氯離子、碘例子和磷酸根離子均對(duì) Terminal Transferase 活性具有抑制作用。
3、DNA 末端 mol 數(shù)的計(jì)算,長(zhǎng)度為 100bp 的 DNA:1pmol末端 DNA=0.33ng。
HotStart RAPA3G DNA Polymerase 為第三代 DNA 聚合酶,具有 5’-3’外切酶活性,不具有 3’-5’外切酶活性,其 具有*高的雜質(zhì)耐受性(對(duì)乙醇、胍鹽、肝素具有極高的耐 受性),???此對(duì)于純度較差的 DNA 模板,該酶仍然可以獲得 理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。RAPA3G DNA 聚合酶為化學(xué)法修飾的 HotStart 版本,其在 50℃以下 100%無(wú)活性,只有 95℃條件 下加熱 5min 后才能完全恢復(fù)酶的活力。因此該系統(tǒng)可以有 效抑制非特異性 PCR 擴(kuò)增,極大的提高了 PCR 擴(kuò)增特異性 和靈敏度。該酶配有獨(dú)特的反應(yīng)緩沖液,可在寬范圍中得到 良好的擴(kuò)增結(jié)果、檢測(cè)靈敏度更高、信號(hào)更強(qiáng)。

使用說(shuō)明:

1. 按照如下組分配制 50 μl PCR 反應(yīng)體系:
注意:(1)在 50 μl 的 PCR 反應(yīng)體系中 HotStart RAPA3GDNA Polymerase 的用量可在 0.1-0.5 μl 進(jìn)行調(diào)整。(2)Mg2+的濃度通常在 2-4 mM 時(shí)可獲得理想的擴(kuò)增結(jié)果。
2. qPCR 擴(kuò)增程序用兩步法:
 Stage 1: 95℃ 5min
 Stage 2: 95℃ 10s
60℃ 30s 25-40 cycles
注意:由于該酶為化學(xué)修飾的熱啟動(dòng) RAPA3G DNA 聚合酶,必須于 95℃加熱 5min 才能恢復(fù)酶的活性,該熱啟動(dòng)步驟不能縮短時(shí)間。
3. 常規(guī) PCR 三步法程序:
 Stage 1: 95℃ 5min
 Stage 2: 95℃ 10s
 50-60℃(退火) 20s
72℃ 4kb/min 25-40 cycles
Stage 3: 72℃ 5min
注意:由于該酶為化學(xué)修飾的熱啟動(dòng) RAPA3G DNA 聚合酶,必須于 95℃加熱 5min 才能恢復(fù)酶的活性,該熱啟動(dòng)步驟不能縮短時(shí)間。

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