商品屬性:
貨號(hào)
規(guī)格
產(chǎn)品名稱(chēng)
A-PJ1036-250T
250T
HiFi One-Step RT-PCR Mix(電泳)
儲(chǔ)存條件:
HiFi One-Step RT-PCR Mix(電泳)儲(chǔ)存:-20℃ 可保存 3 年。
產(chǎn)品介紹:
末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)是一種不依賴(lài)于模板的 DNA 聚 合酶,催化脫氧核苷酸結(jié)合到 DNA 分子的 3’羥基端。帶有 突出、凹陷或平滑末端的單雙鏈 DNA 分子均可作為 TdT 的 底物,加尾長(zhǎng)度可達(dá) 5~300nt。本酶經(jīng)電子重構(gòu)架技術(shù)篩選, 使其可以在 45°C 高溫下反應(yīng),從而避免因 DNA 二級(jí)結(jié)構(gòu)造 成的加尾效率下降。 該酶廣泛用于 DNA 的 3’末端添加同聚物、利用修飾堿 基(如 ddNTP,DIGdUTP)標(biāo)記 DNA 3’末端、TdT 介導(dǎo)的 dUTP 缺口末端標(biāo)記技術(shù)(細(xì)胞凋亡的原位檢測(cè))等試驗(yàn)。 活性定義:37 ℃ 60 分鐘內(nèi),催化 1nmol dNTP 加入到多聚核苷酸 3’羥基末端中所需的酶量定義為 1 個(gè)活性單位 熱失活:75°C 20min。
注意事項(xiàng):
1、適量 EDTA 可使 Terminal Transferase 的活性喪失。 2、金屬離子螯合劑,較高濃度的銨根離子、氯離子、碘例子和磷酸根離子均對(duì) Terminal Transferase 活性具有抑制作用。 3、DNA 末端 mol 數(shù)的計(jì)算,長(zhǎng)度為 100bp 的 DNA:1pmol末端 DNA=0.33ng。 本試劑采用穩(wěn)定高效的 RT-PCR 預(yù)混體系,是以 RNA 為模板進(jìn)行一步法 RT-PCR 的專(zhuān)用試劑。其原理為用基因特 異性引物進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng),獲得**鏈 cDNA(不可使用 Oligo(dT)或 Random Rimer 合成**鏈 cDNA),再使 用基因特異性正向引物和反向引物進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增,在同一 反應(yīng)體系中一步完成從反轉(zhuǎn)錄到 PCR 的全部過(guò)程。反應(yīng)體 系中已含有電泳所需的指試劑(藍(lán)色和黃色),反應(yīng)后可以 直接進(jìn)行電泳。 在本試劑盒中,將耐熱 M-MLV 反轉(zhuǎn)錄酶、Rnase Inhibitor、 Hotstart 高 保 真 DNA 聚合酶以及穩(wěn)定劑等配制成 50×One-Step Enzyme Mix 預(yù)混液;反應(yīng) Buffer、dNTP 以及 電泳指示染料配制成 5×HiFi One-Step RT-PCR Buffer,因此 使得操作更加簡(jiǎn)單便,擴(kuò)增產(chǎn)物可用于平端克隆和 DNA 測(cè) 序。
主要優(yōu)勢(shì):
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