商品屬性：
貨號
規(guī)格
產(chǎn)品名稱
A-Hc2235-100U
100U
Topoisomerase I (Vaccinia virus)
儲存條件：
Topoisomerase I (Vaccinia virus)儲存：-20°C 可保存 3 年。 產(chǎn)品介紹： 該 Topoisomerase I 來源于牛痘病毒（vaccinia virus），通過基因重組方案制備純化。其能解旋DNA的超螺旋結(jié)構(gòu)，除此外其能識別并切割雙鏈 DNA 末端 [5’C(T)CCTT↓]，并且與 DNA 形成共價(jià)連接形成穩(wěn)定復(fù)合物。該共價(jià)復(fù)合物遇到DNA 的5’-OH基團(tuán)后，重新連接形成完整 DNA 鏈。因此，使用該酶可作為 DNA 連接的有效工具，可用于 DNA 的載體連接（TOPO 克隆載體制備）、接頭連接（NGS 建庫）等實(shí)驗(yàn)。 應(yīng)用： DNA-載體連接 接頭連接 儲存： -20°C 可保存 3 年。 TOPO 酶保存液：20mM Tris-HCl，pH7.8，150mM NaCl， 0.1% Tween20，50%甘油。 反應(yīng)實(shí)例 1（質(zhì)粒解旋） 10×TOPO Buffer 2.5 μl 超螺旋質(zhì)粒 DNA 1-20 μg Vaccinia TOPO (5pmol/μl) 1 μl ddH2O Up to 25 ul 37°C 孵育 5-15min。 反應(yīng)實(shí)例 2（接頭連接） 10×TOPO Buffer 2.5 μl 2 M NaCl 2.5 μl 接頭 A(含 CCCTT) 5-100 pmol 接頭 B(含 5‘OH) 5-100 pmol Vaccinia TOPO (5pmol/μl) 1 μl ddH2O Up to 25 ul 37°C 孵育 5-15min。 注意：（1）雙鏈接頭 A 通常 5’做 NH2 封閉修飾，以防止自連接；接頭 A 的 CCCTT 后通常包含 5-12bp 尾巴，再長的尾巴會導(dǎo)致連接效率大幅下降； （2）雙鏈接頭 B 的 5’端必須包含-OH。 （3）由于該酶應(yīng)用廣泛，在不同的實(shí)驗(yàn)中使用策略不同，需要靈活運(yùn)用。該類實(shí)驗(yàn)請根據(jù)文獻(xiàn)）進(jìn)行調(diào)整。 公司正在出售的產(chǎn)品：
產(chǎn)品介紹：
該 Topoisomerase I 來源于牛痘病毒（vaccinia virus），通過基因重組方案制備純化。其能解旋DNA的超螺旋結(jié)構(gòu)，除此外其能識別并切割雙鏈 DNA 末端 [5’C(T)CCTT↓]，并且與 DNA 形成共價(jià)連接形成穩(wěn)定復(fù)合物。該共價(jià)復(fù)合物遇到DNA 的5’-OH基團(tuán)后，重新連接形成完整 DNA 鏈。因此，使用該酶可作為 DNA 連接的有效工具，可用于 DNA 的載體連接（TOPO 克隆載體制備）、接頭連接（NGS 建庫）等實(shí)驗(yàn)。
應(yīng)用：
DNA-載體連接 接頭連接
儲存：
-20°C 可保存 3 年。 TOPO 酶保存液：20mM Tris-HCl，pH7.8，150mM NaCl， 0.1% Tween20，50%甘油。 反應(yīng)實(shí)例 1（質(zhì)粒解旋） 10×TOPO Buffer 2.5 μl 超螺旋質(zhì)粒 DNA 1-20 μg Vaccinia TOPO (5pmol/μl) 1 μl ddH2O Up to 25 ul 37°C 孵育 5-15min。 反應(yīng)實(shí)例 2（接頭連接） 10×TOPO Buffer 2.5 μl 2 M NaCl 2.5 μl 接頭 A(含 CCCTT) 5-100 pmol 接頭 B(含 5‘OH) 5-100 pmol Vaccinia TOPO (5pmol/μl) 1 μl ddH2O Up to 25 ul 37°C 孵育 5-15min。 注意：（1）雙鏈接頭 A 通常 5’做 NH2 封閉修飾，以防止自連接；接頭 A 的 CCCTT 后通常包含 5-12bp 尾巴，再長的尾巴會導(dǎo)致連接效率大幅下降； （2）雙鏈接頭 B 的 5’端必須包含-OH。 （3）由于該酶應(yīng)用廣泛，在不同的實(shí)驗(yàn)中使用策略不同，需要靈活運(yùn)用。該類實(shí)驗(yàn)請根據(jù)文獻(xiàn)）進(jìn)行調(diào)整。
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