商品屬性:
貨號
規(guī)格
產(chǎn)品名稱
A-Hc2226-20 μl
20 μl
pET-22b(+) Seamless Cloning Kit(線性化質(zhì)粒)
儲存條件:
pET-22b(+) Seamless Cloning Kit(線性化質(zhì)粒)保存條件:-20℃保存
產(chǎn)品介紹:
pET-22b(+)載體為高水平的原核表達載體,在N端含有PelB信號肽序列,能夠?qū)⒈磉_的目的蛋白定位在細胞外周質(zhì)腔,同時在C端具有His標簽。本產(chǎn)品提供pET-22b(+)經(jīng)EcoRⅠ酶切后的線性化載體,可用無縫克隆技術(shù)將單個或多個DNA片段組裝到載體上。 無縫克隆技術(shù)可在重組酶的作用下,只需一步反應(yīng),便可將片段克隆到任何載體中的任意位置,得到重組質(zhì)粒。無縫克隆技術(shù)作為一種非常強大的克隆技術(shù),具有快速、 簡便、高效、多片段組裝和定向克隆等特點,用于單個 DNA 片段的克隆,多個 DNA 片段組裝克隆以及多位點突變構(gòu)建等實驗?zāi)康摹?
產(chǎn)品特點:
1. pET-22b(+)載體為原核表達載體,具有N-PelB signal seqence和C-His標簽。 2. pET-22b(+)經(jīng)EcoRⅠ酶切后的線性化載體,省時省力。 3. 無縫克隆技術(shù)只需要簡單的 PCR 擴增就可以制備片段DNA。 4. 可以克隆長片段和多片段DNA。 5. 簡單、快速、定向克隆。
操作步驟:
1. pET-22b(+)線性化載體使用方法: (1) pET-22b(+)線性化載體當(dāng)做克隆載體使用,可以在擴增PCR產(chǎn)物的 上游引物 5’端添加序列:CGCTGCCCAGCCGGCGATGGCCATG 下游引物 5’端添加序列:CTCAGTGGTGGTGGTGGTGGTGCTCGAG 通過無縫克隆連接到pET-22b(+)中。 (2) 測序引物 T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3' T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3' (3) pET-22b(+)線性化載體為 EcoRⅠ酶切后的線性化載體,圖譜及多克隆位點
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