商品屬性：
貨號
規(guī)格
產(chǎn)品名稱
A-Hc2225-20 μl
20 μl
pcDNA3.1(+) Seamless Cloning Kit（線性化質(zhì)粒）
產(chǎn)品介紹：
pcDNA3.1(+) Seamless Cloning Kit（線性化質(zhì)粒）pcDNA3.1(+)載體為哺乳動物細(xì)胞表達(dá)載體，具有人巨細(xì)胞病毒(CMV)啟動子，在哺乳動物細(xì)胞中高水平表達(dá)；新霉素抗性基因，用于選擇穩(wěn)定細(xì)胞系。本產(chǎn)品提供pcDNA3.1(+)經(jīng)EcoRⅠ酶切后的線性化載體，可用無縫克隆技術(shù)將單個或多個DNA片段組裝到載體上。 無縫克隆技術(shù)可在重組酶的作用下，只需一步反應(yīng)，便可將片段克隆到任何載體中的任意位置，得到重組質(zhì)粒。無縫克隆技術(shù)作為一種非常強大的克隆技術(shù)，具有快速、簡便、高效、多片段組裝和定向克隆等特點，用于單個 DNA 片段的克隆，多個 DNA 片段組裝克隆以及多位點突變構(gòu)建等實驗?zāi)康摹?
產(chǎn)品特點：
1. pcDNA3.1(+)具有人巨細(xì)胞病毒(CMV)啟動子，在哺乳動物細(xì)胞中高水平表達(dá)。 2. pcDNA3.1(+)具有新霉素抗性基因，用于選擇穩(wěn)定細(xì)胞系。 3. pcDNA3.1(+)經(jīng)EcoRⅠ酶切后的線性化載體，省時省力。 4. 無縫克隆技術(shù)只需要簡單的 PCR 擴(kuò)增就可以制備片段DNA。 5. 可以克隆長片段和多片段DNA。
操作步驟：
1. pcDNA3.1(+)線性化載體使用方法： (1) pcDNA3.1(+)線性化??體當(dāng)做克隆載體使用，可以在擴(kuò)增PCR產(chǎn)物的 上游引物 5’端添加序列：TAGGGAGACCCAAGCTGGCTAGCgccacc（gccacc為Kozak序列） 下游引物 5’端添加序列：CACTGTGCTGGATATCTGCAGAATTC 通過無縫克隆連接到pcDNA3.1(+)中。 (2) 測序引物 pcDNA3.1-F:CTAGAGAACCCACTGCTTAC pcDNA3.1-R(BGH-R):TAGAAGGCACAGTCGAGG (3) pcDNA3.1(+)線性化載體為 EcoRⅠ酶切后的線性化載體，圖譜及多克隆位點
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