商品屬性：

儲(chǔ)存條件：

通用DNA純化回收試劑盒保存條件：本試劑盒在室溫儲(chǔ)存 12 個(gè)月不影響使用效果。

產(chǎn)品介紹：

在高離序鹽存在的情況下，DNA 片斷選擇性的吸附于離心柱內(nèi)的硅基質(zhì)膜上，再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟，漂洗液將引物、核苷酸、蛋白、酶等雜質(zhì)去除，*后低鹽、高 pH 值的洗脫緩沖液將純凈 DNA 從硅基質(zhì)膜上洗脫。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
1.獨(dú)特的吸附柱設(shè)計(jì)，消除了液體殘留及污染，并且洗脫體積*低可至 5μl。
2.使用了上等溶膠液，不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽，不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應(yīng)。
3.獨(dú)特的溶膠液/結(jié)合液配方，將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一，因此一個(gè)試劑盒可以運(yùn)用于瓊脂糖 DNA 回收、PCR 產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況，節(jié)省了需購(gòu)買多種試劑盒的費(fèi)用。
4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色，便于觀察溶膠效果和監(jiān)測(cè) pH 值變化從而達(dá)到*佳結(jié)合效果，大大提高回收效率。
5.可回收 50bp-25kb 片段，每個(gè)吸附柱可吸附 DNA 量為 5μg。
適用范圍：
適用于瓊脂糖凝膠 DNA 回收、PCR 反應(yīng)產(chǎn)物純化回收、酶切產(chǎn)物 DNA 片段純化回收、探針標(biāo)記后純化回收、DNA 樣品濃縮等。

注意事項(xiàng)：

1.所有的溶液應(yīng)該是澄清的，如果環(huán)境溫度低時(shí)溶液可能形成沉淀，此時(shí)不應(yīng)該直接使用，可在 37℃水浴加熱幾分鐘，即可恢復(fù)澄清。使用前應(yīng)該恢復(fù)到室溫。
2.儲(chǔ)存于低溫（4℃或者-20℃）會(huì)造成溶液沉淀，影響使用效果，因此運(yùn)輸和儲(chǔ)存均在室溫下（15℃-25℃）進(jìn)行。
3.避免試劑長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、pH 值變化，各溶液使用后應(yīng)及時(shí)蓋緊蓋子。
4.溶膠液/結(jié)合液中含有刺激性化合物，操作時(shí)要戴乳膠手套，避免沾染皮膚，眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時(shí)，要立即用大量清水或者生理鹽水沖洗。
5.回收純化的 DNA 片段一般在 50bp 到 25kb 之間，過長(zhǎng)、過短片段的回收效率迅速降低?；厥?DNA 的量和起始 DNA 的量、洗脫體積、DNA 片段大小有關(guān)，一般為 5μg。100bp-5kb 的 DNA 片段，回收率可高達(dá) 85％-95％。大于 10kb 的 DNA片段，可減少洗脫體積，提高濃度。
6.切膠回收時(shí)，紫外燈觀察對(duì) DNA 片段有損壞作用，應(yīng)該盡可能使用能量低的長(zhǎng)波紫外線，并且盡可能的縮短紫外線下處理的時(shí)間。
7.pH 值≤7.5 時(shí)，吸附膜吸附 DNA 的效率*高。如果切下來的凝膠中含有電泳緩沖液太多，造成溶膠后溶膠液 pH 偏高，會(huì)導(dǎo)致回收率降低。溶膠后，如果溶膠液依舊保持黃色，說明 pH 正常；如果變成橘紅色或者淡紫色，說明 pH 偏高，可在膠充分溶解后加 5-10μl 3M 醋酸鈉（pH5.2）將 pH 值調(diào)到 5-7（黃色）。
8.洗脫液 EB 不含有螯合劑 EDTA，不影響下游酶切、連接等反應(yīng)。也可以使用水洗脫，但應(yīng)該確保 pH 大于 7.5，pH 過低影響洗脫效率。用水洗脫，DNA 片段應(yīng)該保存在-20℃。DNA 片段如果需要長(zhǎng)期保存，可以用 TE 緩沖液洗脫（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是 EDTA 可能影響下游酶切反應(yīng)，使用時(shí)可以適當(dāng)稀釋。
自備試劑：無水乙醇

操作步驟：

提示：**次使用前請(qǐng)先在漂洗液 WB 中加入指定量無水乙醇，加入后請(qǐng)及時(shí)打鉤標(biāo)記已加入乙醇，以免多次加入!
1.瓊脂糖凝膠 DNA 回收：
1）在長(zhǎng)波紫外燈下，用干凈刀片將所需回收的 DNA 條帶切下，盡量切除不含 DNA的凝膠，得到凝膠體積越小越好。
2）將切下的含有 DNA 條帶凝膠放入 1.5ml 或 2ml 離心管。
3）加 500μl 體積溶膠/結(jié)合液 DB。（膠塊與溶膠/結(jié)合液比例 1:1 至 1:5，回收率不受影響。）
4）50℃水浴放置 10min（或直至膠完全溶解）。期間不斷溫和地上下翻轉(zhuǎn)離心管，以確保膠塊充分溶解。
5）將上一步所得溶液加入微量 DNA 吸附柱中（吸附柱放入收集管中），室溫放置 1min，12,000rpm 離心 1min，倒掉收集管中的廢液。
6）加入 500μl 漂洗液 WB（請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙醇!），12,000rpm 離心 1min，棄掉廢液。
7）重復(fù)操作步驟 6。
8）將微量 DNA 吸附柱放回空收集管中，12,000rpm 離心 1min，盡量去除漂洗液，以免漂洗液中殘留乙醇抑制下游反應(yīng)。
9）取出微量 DNA 吸附柱，放入一個(gè)干凈的 1.5ml 離心管中，室溫放置數(shù)分鐘。
10）在吸附膜的中間部位滴加洗脫緩沖液 EB 10μl（洗脫緩沖液事先在 65-70℃水浴中加熱效果更好），12,000rpm 離心 1min。如果需要較多量 DNA，可將得到的溶液重新加入吸附柱中，離心 1min。(注意：洗脫體積一般為 10μl，根據(jù)樣品濃度，洗脫體積 5μl 至 50μl 均可。)
2.PCR 產(chǎn)物或者酶切片段等 DNA 純化：
1）每 100μl PCR 擴(kuò)增后體系或者酶切后體系加入 500μl 溶膠/結(jié)合液 DB，充分混勻。（產(chǎn)物與溶膠/結(jié)合液比例 1:1 至 1:5，回收率不受影響。）
2）將上一步所得溶液加入微量 DNA 吸附柱中（吸附柱放入收集管中），室溫放置1min，12,000rpm 離心 1min，倒掉收集管中的廢液。
3）從此步驟開始和瓊脂糖凝膠 DNA 回收的操作步驟 6-10 完全一致，請(qǐng)參見瓊脂糖凝膠 DNA 回收的操作步驟 6-10。

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