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產(chǎn)品名稱
A-Hc2025-100次
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多功能DNA純化回收試劑盒
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儲存條件：
多功能DNA純化回收試劑盒保存條件：本試劑盒在室溫儲存 12 個(gè)月不影響使用效果。
產(chǎn)品介紹：
在高離序鹽存在的情況下，DNA 片斷選擇性的吸附于離心柱內(nèi)的硅基質(zhì)膜上，再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟，漂洗液將引物、核苷酸、蛋白、酶等雜質(zhì)去除，*后低鹽、高 pH 值的洗脫緩沖液將純凈 DNA 從硅基質(zhì)膜上洗脫。 產(chǎn)品特點(diǎn)： 1.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復(fù)性好?？朔藝a(chǎn)??劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。 2.使用了上等溶膠液，不含傳統(tǒng)溶膠液的碘化鈉和高氯酸鹽，不抑制回收后酶切、連接克隆等下游反應(yīng)。 3.獨(dú)特的溶膠液/結(jié)合液配方，將溶膠和結(jié)合兩種功能統(tǒng)一，因此一個(gè)試劑盒可以運(yùn)用于瓊脂糖 DNA 回收、PCR 產(chǎn)物清潔純化、酶切產(chǎn)物純化回收等多種情況，節(jié)省了需購買多種試劑盒的費(fèi)用。 4.溶膠液/結(jié)合液調(diào)制成為了黃顏色，便于觀察溶膠效果和監(jiān)測 pH 值變化從而達(dá)到*佳結(jié)合效果，大大提高回收效率。 5.簡單快速、使用方便。 適用范圍： 適用于瓊脂糖凝膠 DNA 回收、PCR 反應(yīng)產(chǎn)物純化回收、酶切產(chǎn)物 DNA 片斷純化回收、探針標(biāo)記后純化回收、DNA 樣品濃縮等。
注意事項(xiàng)：
1.所有的溶液應(yīng)該是澄清的，如果環(huán)境溫度低時(shí)溶液可能形成沉淀，此時(shí)不應(yīng)該直接使用，可在 37℃水浴加熱幾分鐘，即可恢復(fù)澄清。使用前應(yīng)該恢復(fù)到室溫。
操作步驟：
提示：**次使用前請先在漂洗液 WB 中加入指定量無水乙醇，加入后請及時(shí)打鉤標(biāo)記已加入乙醇，以免多次加入! 1.瓊脂糖凝膠 DNA 回收： 1）在長波紫外燈下，用干凈刀片將所需回收的 DNA 條帶切下，盡量切除不含 DNA的凝膠，得到凝膠體積越小越好。 2）將切下的含有 DNA 條帶凝膠放入 1.5ml 離心管，稱重。 3）加 3 倍體積溶膠/結(jié)合液 DB。（凝膠重為 100mg，則加入 300μl 溶膠液）如果凝膠濃度大于 2％，應(yīng)加入 6 倍體積溶膠液。 4）56℃水浴放置 10min（或直至膠完全溶解）。每 2-3min 渦旋震蕩一次幫助加速溶解。 5）將上一步所得溶液加入吸附柱 EC 中（吸附柱放入收集管中），室溫放置1min ,12,000rpm 離心 30-60sec，倒掉收集管中的廢液。 6）加入 500μl 漂洗液 WB（請先檢查是否已加入無水乙醇!），12,000rpm 離心 30sec，棄掉廢液。 7）重復(fù)操作步驟 6。 8）將吸附柱 EC 放回空收集管中，12,000rpm 離心 2min，盡量去除漂洗液，以免漂洗液中殘留乙醇抑制下游反應(yīng)。 9）取出吸附柱 EC，放入一個(gè)干凈的離心管中，室溫放置數(shù)分鐘。 10）在吸附膜的中間部位滴加洗脫緩沖液 EB（洗脫緩沖液事先在 65-70℃水浴中加熱效果更好），室溫放置 2min，12,000rpm 離心 1min。如果需要較多量 DNA，可將得到的溶液重新加入吸附柱中，離心 1min。(注意：洗脫體積不應(yīng)小于 30μl，體積過少影響回收效率) 2.PCR 產(chǎn)物或者酶切片段等 DNA 純化： 1）每 100μlPCR 擴(kuò)增后體系或者酶切后體系加入 500μl 溶膠/結(jié)合液 DB，充分混勻。（如果初始體系小于 100μl，請事先用雙蒸水調(diào)整至 100μl）。 2）將上一步所得溶液加入吸附柱 EC 中（吸附柱放入收集管中），室溫放置 1min，12,000rpm 離心 30-60sec，倒掉收集管中的廢液。 3）從此步驟開始和瓊脂糖凝膠 DNA 回收的操作步驟 6-10 完全一致，請參見瓊脂糖凝膠 DNA 回收的操作步驟 6-10。
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