公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
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產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號(hào)
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EJ-1[EJ1]細(xì)胞
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詳見說明書
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FS-X5435
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產(chǎn)品名稱:膀胱癌細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè)
4、培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
25(S)-魯斯可皂苷元-1-O-α-L-吡喃鼠李糖基...英文名稱: Boc-Asp(OtBu)-OH組蛋白H4抗體包裝5g
25-脫澤瀉A;澤瀉G(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Boc-D-Pro-OH乙?;M蛋白H4抗體包裝1g
26-脫氧升麻苷英文名稱: Boc-Ser-OMe三基化組蛋白H3抗體包裝5g
28-O-順芷?;赘傩萝赵⑽拿Q: N-BOC-O-Benzyl-L-serine二基化組蛋白H3抗體包裝1g
28-去基-β-香樹脂酮英文名稱: Boc-Thr-OH二基化組蛋白H3K4抗體包裝5g
28-去基-β-香樹脂酮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Boc-L-Trp(For)-OH二基化組蛋白H3K9抗體包裝1g
2’-乙酰基毛蕊花糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Boc-D-Tyr-OH三基化組蛋白H3抗體包裝5g
2”-O-沒食子?;鸾z桃苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Boc-Tyr-OMe乙酰化組蛋白H3抗體包裝1g
3"-O-基表沒食子兒茶素沒食子酸酯英文名稱: Boc-O-(2-bromo-Cbz)-L-Tyrosine乙?;M蛋白H3抗體包裝250mg
3',4',5',5,7-五氧基黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Boc-O-tert-butyl-L-tyrosine磷酸化肝核因子4α抗體包裝5g
3',4',7-三羥基黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Boc-D-Val-OH高遷移率核小體結(jié)合蛋白1包裝1g
3'-氧基葛根素英文名稱: Boc-Phg-OH磷酸化組蛋白H3抗體包裝100g
3'-牻牛兒基-3-異戊烯基-5,7,2',4'-四羥...英文名稱: BOC-L-Homophenylalanine組織相容性復(fù)合體α抗體包裝25g
3'-羥基葛根素英文名稱: BOC-D-Serine methyl ester肝生長因子激活抑制蛋白2抗體包裝1g
3'-羥基紫檀茋英文名稱: Boc-Arg(Pbf)-OHHOMER2抗體包裝25g
EJ-1[EJ1]細(xì)胞大腸埃希氏菌Human NEO1(Neogenin) ELISA KitAlias: NEO1|Neogenin|NEO|NGN|ImmunoglobulinsuperfamilyDCCsubclassmember2|neogenin1|neogeninhomolog1ELISAKitReactivity: Human
匍枝根霉(黑根霉)Human NAIP(Baculoviral IAP repeat-containing protein 1) ELISA KitAlias: NAIP(NeuronalApoptosisInhibitoryProtein)|BIRC1|NLRB1|baculoviralIAPrepeat-containing1|NLRfamily|apoptosisinhibitoryprotein|NLRfamily|BIRdomaincontaining1|nucleotide-bindingoligomerizationdomain|leucinerichrepeatandBIRdomaincontaining1|psineuronalapoptosisinhibitoryprotein|psiNAIPELISAKitReactivity: Human
解烴棒桿菌Human PACRG(Parkin coregulated gene protein) ELISA KitAlias: PACRG|Parkincoregulatedgeneprotein|Molecularchaperonin-bindingprotein|PARK2coregulatedgeneproteinELISAKitReactivity: Human
草假單胞菌Human CX3CR1(CX3C chemokine receptor 1) ELISA KitAlias: CX3CR1|CMKbRL1|V28|Betachemokinereceptor-like1|chemokine(C-C)receptor-like1|CMKBRL1|CMK-BRL1|CMK-BRL-1|CMKDR1|CX3Cchemokinereceptor1|Fractalkinereceptor|Gprotein-coupledreceptor13|GPR13G-proteincoupledreceptor13|GPRV28|V28C-X3-CCKR-1ELISAKitReactivity: Human
釀酒酵母Human JUP(Junction plakoglobin) ELISA KitAlias: JUP|Junctionplakoglobin|Desmoplakin-3|Cateningamma|DesmoplakinIIIELISAKitReactivity: Human
橙色土地桿菌Human CFL1(Cofilin-1) ELISA KitAlias: CFL1(Cofilin1|Non-Muscle)|Cofilin-1|18kDaphosphoprotein|p18|Cofilin|non-muscleisoformELISAKitReactivity: Human
球毛殼Human EPCA2(Early Prostate Cancer Antigen 2) ELISA KitAlias: EPCA2ELISAKitReactivity: Human
大腸埃希氏菌Human IZUMO1(Izumo sperm-egg fusion protein 1) ELISA KitAlias: IZUMO1(Izumosperm-eggfusionprotein1)|OBF|Oocytebinding|fusionfactor|Sperm-specificproteinizumoELISAKitReactivity: Human