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產(chǎn)品名稱：舌鱗癌細胞
來源：舌鱗癌；男性

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

扁蓄苷(標準品)英文名稱： Iohexol口蹄疫病A型抗體(N端)包裝25g

表白樺脂酸（標準品）英文名稱： Maltose Phosphorylase 5U/mg腎刷狀緣抗體包裝500g

表兒茶素（標準品）英文名稱： MetribuzinFLAG Tag標簽抗體（N端）包裝5g

表兒茶素沒食子酸酯（標準品）英文名稱： MU-alpha-GALFAM166A蛋白抗體包裝100g

表告依春（標準品）英文名稱： Mucic acid脂肪酸合成酶抗體包裝25g

表戈米辛O（標準品）英文名稱： Naphthol AS-MX phosphate腦型脂肪酸結合蛋白抗體(C端)包裝5g

表沒食子兒茶素（標準品）英文名稱： Potassium oxalate, monohydrate磷酸化纖維束蛋白同源物1抗體包裝1g

表沒食子兒茶素沒食子酸酯（標準品）英文名稱： Sodium bitartrate, monohydrate粘著斑激酶抗體包裝5g

表木栓（標準品）英文名稱： Sodium sulfate, decahydrate凝血因子5抗體包裝100mg

表小檗堿（標準品）英文名稱： Span* 40成纖維生長因子10抗體包裝1g

別隱品堿;A-別隱品堿(標準品)英文名稱： Tyramine hydrochlorideXIAP相關因子1凋亡抑制蛋白抗體包裝250mg

濱蒿內(nèi)酯（標準品）英文名稱： 2-Furoic acid羊抗人纖維蛋白原抗體包裝1g

檳榔（標準品）英文名稱： 2-MethylimidazoleFas活化激酶結構域蛋白5抗體包裝250mg

檳榔花（標準品）英文名稱： 6-ChloropurineF-box蛋白38抗體包裝100g

波棱瓜子（標準品）英文名稱： Big CHAPFK506結合蛋白38抗體包裝25g
OSCS-19細胞大腸埃希菌Human KERA(KeRatocan) ELISA KitAlias: KERA|KeRatansulfateproteoglycankeRatocan|KTN|SLRR2BELISAKitReactivity: Human

雅致枝霉Human LZMg(Lysozyme G) ELISA KitAlias: lysozymeGELISAKitReactivity: Human

谷氨酸棒桿菌Human LAMA4(Laminin Alpha 4) ELISA KitAlias: LAMA4|LAMA4|lamininalpha4chain|lamininsubunitalpha-4|laminin|alpha4|Laminin-14subunitalpha|Laminin-8subunitalpha|Laminin-9subunitalphaELISAKitReactivity: Human

季也蒙邁耶氏酵母Human LAT(Linker For Activation of T-cell) ELISA KitAlias: LAT|36kDaphospho-tyrosineadapterprotein(pp36)|pp36|36kDaphospho-tyrosineadapterprotein|LAT1|36kDaphospho-tyrosineadaptorprotein|linkerforactivationofTcells|linkerforactivationofT-cellsfamilymember1|p36-38ELISAKitReactivity: Human

大孔菌Human LACTβ(β-Lactamase) ELISA KitAlias: LACTβELISAKitReactivity: Human

嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌Human LDL(Low Density Lipoprotein) ELISA KitAlias: LDL(Low-densitylipoprotein)ELISAKitReactivity: Human

黃色糖多孢菌Human LCA/CD45(Leukocyte Common Antigen) ELISA KitAlias: LCA|CD45|CD45|LCA|PTPRC|T200Glycoprotein|B220|CD45antigen|CD45R|EC3.1.3.48|L-CA|LY5|proteintyrosinephosphatase|receptortype|C|receptor-typetyrosine-proteinphosphataseC|T200glycoprotein|T200leukocytecommonantigen|T200receptortype|cpolypeptideELISAKitReactivity: Human

居屬Human LDHB(Lactate Dehydrogenase B) ELISA KitAlias: LDHB(LactateDehydrogenaseB)|LDH-B|LDH-HELISAKitReactivity: Human

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