產品名稱：豬肺微血管內皮細胞
來源：肺微血管；內皮細胞

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

公司細胞現貨供應，質量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

香草（熔點標準品）英文名稱： Milnacipran雙特異性磷酸酶2抗體包裝10MG

香蘭素,香草(標準品)英文名稱： Tetrabenazine21號染色體開放閱讀框106抗體包裝250mg

香葉（標準品）英文名稱： Tetrabenazine同源轉錄因子DLX5抗體包裝1g

消旋卡多曲（標準品）英文名稱： VigabatrinDVL3蛋白抗體包裝1g

消旋瑞格列奈（標準品）英文名稱： O-Desmethylvenlaine(DL)DNA依賴蛋白激酶催化亞基抗體包裝250mg

消旋山莨菪堿雜質Ⅰ（標準品）英文名稱： FlumethasoneGADD153抗體包裝1g

消旋鹽酸替羅非班（標準品）英文名稱： Flumethasone中間絲蛋白β-synemin抗體包裝250mg

硝苯地平雜質ⅠI（標準品）英文名稱： Ritodrine HClMAP激酶激活死亡域蛋白4C抗體包裝1g

硝苯地平雜質Ⅰ（標準品）英文名稱： Ritodrine HCl橋粒糖蛋白4抗體包裝1g

硝呋酚酰肼；硝呋奇特(標準品)英文名稱： Indinavir sulfate酶動力蛋白3抗體包裝5g

硝呋太爾(標準品)英文名稱： Tazobactam sodiumδ連環(huán)蛋白/δ連環(huán)素/δ鏈接素（δ-catenin）抗體包裝100ml

硝基呋喃烯酸（標準品）英文名稱： Tazobactam sodium胞漿接頭蛋白Dok6抗體包裝1g

硝普鈉（標準品）英文名稱： D-Cycloserine胞漿接頭蛋白Dok5抗體包裝25g

硝酸奧昔康唑（標準品）英文名稱： D-Cycloserine癌中心體相關蛋白抗體包裝5g

硝酸(標準品)英文名稱： Tetracycline hydrochlorideDCAF13蛋白抗體包裝1g
PLMVEC細胞釀酒酵母Human HEV-IgM(hepatitis E virus-Immunoglobulin M) ELISA KitAlias: HEV-IgMELISAKitReactivity: Human

松針散斑殼Human SCRG1(Scrapie responsive protein 1) ELISA KitAlias: scrapieresponsiveprotein1|SCRG1|SCRG1ELISAKitReactivity: Human

枯草芽孢桿菌Human alpha 1 microglobulin ELISA KitAlias: alpha1microglobulinELISAKitReactivity: Human

深紅酵母Human LAMTOR1(Ragulator complex protein LAMTOR1) ELISA KitAlias: LAMTOR1ELISAKitReactivity: Human

微白類諾卡氏菌Human EZH2(Enhancer of zeste homolog 2) ELISA KitAlias: Histone-lysineN-methyltransferaseEZH2|ENX-1|Enhancerofzestehomolog2|LysineN-methyltransferase6|KMT6ELISAKitReactivity: Human

凱斯特鞘氨醇單胞菌Human HBcAb(hepatitis B virus Core antibody) ELISA KitAlias: HBcAbELISAKitReactivity: Human

尖角凸臍蠕孢Human PHF6(PHD finger protein 6) ELISA KitAlias: PHD-likezincfingerprotein|CENP-31|KIAA1823ELISAKitReactivity: Human

薔薇生鏈格孢Human HAV-IgM(hepatitis A virus-Immunoglobulin M) ELISA KitAlias: HAV-IgMELISAKitReactivity: Human

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