實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

產(chǎn)品名稱：甲狀腺癌細(xì)胞
來源：甲狀腺濾泡細(xì)胞癌；男性

培養(yǎng)基：L15

狀態(tài)：貼壁

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)elisa檢測試劑盒英文名稱：Free-T3 ELISA Kit，英文縮寫：Free-T3，產(chǎn)品別名：游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA檢測試劑盒，游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

胰島素生長因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)elisa檢測試劑盒英文名稱：IGF-Ⅱ ELISA Kit，英文縮寫：IGF-Ⅱ，產(chǎn)品別名：胰島素生長因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)ELISA檢測試劑盒，胰島素生長因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

異丙腎上腺素(iso-Hyd)elisa檢測試劑盒英文名稱：iso-Hyd ELISA Kit，英文縮寫：iso-Hyd，產(chǎn)品別名：異丙腎上腺素(iso-Hyd)ELISA檢測試劑盒，異丙腎上腺素(iso-Hyd)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

血小板相關(guān)抗體IgM(PA-IgM)elisa檢測試劑盒英文名稱：PA-IgM ELISA Kit，英文縮寫：PA-IgM，產(chǎn)品別名：血小板相關(guān)抗體IgM(PA-IgM)ELISA檢測試劑盒，血小板相關(guān)抗體IgM(PA-IgM)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

血紅蛋白α亞基(HB-α)elisa檢測試劑盒英文名稱：HB-α ELISA Kit，英文縮寫：HB-α，產(chǎn)品別名：血紅蛋白α亞基(HB-α)ELISA檢測試劑盒，血紅蛋白α亞基(HB-α)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)elisa檢測試劑盒英文名稱：ANG-Ⅱ ELISA Kit，英文縮寫：ANG-Ⅱ，產(chǎn)品別名：血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA檢測試劑盒，血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

鋅指蛋白644(ZNF644)elisa檢測試劑盒英文名稱：ZNF644 ELISA Kit，英文縮寫：ZNF644，產(chǎn)品別名：鋅指蛋白644(ZNF644)ELISA檢測試劑盒，鋅指蛋白644(ZNF644)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

纖溶酶原激活劑(PLGA)elisa檢測試劑盒英文名稱：PLGA ELISA Kit，英文縮寫：PLGA，產(chǎn)品別名：纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA檢測試劑盒，纖溶酶原激活劑(PLGA)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

細(xì)胞凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白(PYCARD)elisa檢測試劑盒英文名稱：PYCARD ELISA Kit，英文縮寫：PYCARD，產(chǎn)品別名：細(xì)胞凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白(PYCARD)ELISA檢測試劑盒，細(xì)胞凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白(PYCARD)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

維生素B2(VB2)elisa檢測試劑盒英文名稱：VB2 ELISA Kit，英文縮寫：VB2，產(chǎn)品別名：維生素B2(VB2)ELISA檢測試劑盒，維生素B2(VB2)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

鐵-過氧化物岐化酶(Fe-SOD)elisa檢測試劑盒英文名稱：Fe-SOD ELISA Kit，英文縮寫：Fe-SOD，產(chǎn)品別名：鐵-過氧化物岐化酶(Fe-SOD)ELISA檢測試劑盒，鐵-過氧化物岐化酶(Fe-SOD)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。
FTC133細(xì)胞Goat Anti-rat IgG/Gold  膠體金標(biāo)記的羊抗大鼠IgG規(guī)格 0.5ml

Goat Anti-rat IgG/FITC  FITC標(biāo)記的羊抗大鼠IgG規(guī)格 0.3ml

Goat Anti-rat IgG/Cy7  Cy7標(biāo)記的羊抗大鼠IgG規(guī)格 0.1ml

Goat Anti-rat IgG/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的羊抗大鼠IgG規(guī)格 0.1ml

Goat Anti-rat IgG/Cy5  Cy5標(biāo)記的羊抗大鼠IgG規(guī)格 0.1ml

Goat Anti-rat IgG/Cy3  Cy3標(biāo)記的羊抗大鼠IgG規(guī)格 0.1ml

Goat Anti-rat IgG/Bio  生物素標(biāo)記的羊抗大鼠IgG規(guī)格 0.1ml
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

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