產(chǎn)品名稱：間皮瘤細(xì)胞
來源：間皮瘤；男性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一???用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)；

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

間皮素(MSLN)elisa檢測試劑盒英文名稱：MSLN ELISA Kit，英文縮寫：MSLN，產(chǎn)品別名：間皮素(MSLN)ELISA檢測試劑盒，間皮素(MSLN)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。

肌球蛋白輕鏈(MLC)elisa檢測試劑盒英文名稱：MLC ELISA Kit，英文縮寫：MLC，產(chǎn)品別名：肌球蛋白輕鏈(MLC)ELISA檢測試劑盒，肌球蛋白輕鏈(MLC)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。

基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β)elisa檢測試劑盒英文名稱：SDF-1β ELISA Kit，英文縮寫：SDF-1β，產(chǎn)品別名：基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β)ELISA檢測試劑盒，基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。

黑色素濃縮(MCH)elisa檢測試劑盒英文名稱：MCH ELISA Kit，英文縮寫：MCH，產(chǎn)品別名：黑色素濃縮(MCH)ELISA檢測試劑盒，黑色素濃縮(MCH)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。

胱天蛋白酶8(Caspase-8)elisa檢測試劑盒英文名稱：Caspase-8 ELISA Kit，英文縮寫：Caspase-8，產(chǎn)品別名：胱天蛋白酶8(Caspase-8)ELISA檢測試劑盒，胱天蛋白酶8(Caspase-8)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。

谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)elisa檢測試劑盒英文名稱：GAD-Ab ELISA Kit，英文縮寫：GAD-Ab，產(chǎn)品別名：谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA檢測試劑盒，谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。

桿狀病IAP重復(fù)包含蛋白2/3(BIRC2/3)elisa檢測試劑盒英文名稱：BIRC2/3 ELISA Kit，英文縮寫：BIRC2/3，產(chǎn)品別名：桿狀病IAP重復(fù)包含蛋白2/3(BIRC2/3)ELISA檢測試劑盒，桿狀病IAP重復(fù)包含蛋白2/3(BIRC2/3)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。

富組蛋白(HTN5)elisa檢測試劑盒英文名稱：HTN5 ELISA Kit，英文縮寫：HTN5，產(chǎn)品別名：富組蛋白(HTN5)ELISA檢測試劑盒，富組蛋白(HTN5)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。

泛素分解酶(DUB)elisa檢測試劑盒英文名稱：DUB ELISA Kit，英文縮寫：DUB，產(chǎn)品別名：泛素分解酶(DUB)ELISA檢測試劑盒，泛素分解酶(DUB)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。

蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M3(M-AChR M3)elisa檢測試劑盒英文名稱：M-AChR M3 ELISA Kit，英文縮寫：M-AChR M3，產(chǎn)品別名：蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M3(M-AChR M3)ELISA檢測試劑盒，蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M3(M-AChR M3)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。

蛋白酶3特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)elisa檢測試劑盒英文名稱：PR3-ANCA ELISA Kit，英文縮寫：PR3-ANCA，產(chǎn)品別名：蛋白酶3特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)ELISA檢測試劑盒，蛋白酶3特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個(gè)月。
NCI-H2452[H2452]細(xì)胞HIF 2α  缺氧誘導(dǎo)因子2α 抗體HIF-2α規(guī)格 0.1ml

HIDE1/C19orfC38  19號(hào)染色體開放閱讀框38抗體規(guī)格 0.2ml

HIAT1  海馬豐富基因轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體規(guī)格 0.2ml

HHV8/ORF50  人類皰疹病8抗體規(guī)格 0.2ml

HHV8/ORF50  人類皰疹病8抗體規(guī)格 0.2ml

HHV8/ORF50  人類皰疹病8抗體規(guī)格 0.2ml

HHV8/ORF K2  人類皰疹病8抗體/皰疹病8型規(guī)格 0.1ml

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