公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
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產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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HPDE細(xì)胞
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T25
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FS-X4186
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產(chǎn)品名稱:胰腺正常導(dǎo)管上皮細(xì)胞
生長特性:貼壁生長
培養(yǎng)條件:DMEM+10%FBS
1:2傳代
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè)
4、培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
髓樣前體細(xì)胞抑制因子2(MPIF2)elisa檢測試劑盒英文名稱:MPIF2 ELISA Kit,英文縮寫:MPIF2,產(chǎn)品別名:髓樣前體細(xì)胞抑制因子2(MPIF2)ELISA檢測試劑盒,髓樣前體細(xì)胞抑制因子2(MPIF2)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
絲氨酸蛋白酶23(PRSS23)elisa檢測試劑盒英文名稱:PRSS23 ELISA Kit,英文縮寫:PRSS23,產(chǎn)品別名:絲氨酸蛋白酶23(PRSS23)ELISA檢測試劑盒,絲氨酸蛋白酶23(PRSS23)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
絲束蛋白3(PLS3)elisa檢測試劑盒英文名稱:PLS3 ELISA Kit,英文縮寫:PLS3,產(chǎn)品別名:絲束蛋白3(PLS3)ELISA檢測試劑盒,絲束蛋白3(PLS3)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
輸入蛋白7(IPO7)elisa檢測試劑盒英文名稱:IPO7 ELISA Kit,英文縮寫:IPO7,產(chǎn)品別名:輸入蛋白7(IPO7)ELISA檢測試劑盒,輸入蛋白7(IPO7)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
矢車菊苷γ3(CENTγ3)elisa檢測試劑盒英文名稱:CENTγ3 ELISA Kit,英文縮寫:CENTγ3,產(chǎn)品別名:矢車菊苷γ3(CENTγ3)ELISA檢測試劑盒,矢車菊苷γ3(CENTγ3)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
生精蛋白Ⅱ(SEMG2)elisa檢測試劑盒英文名稱:SEMG2 ELISA Kit,英文縮寫:SEMG2,產(chǎn)品別名:生精蛋白Ⅱ(SEMG2)ELISA檢測試劑盒,生精蛋白Ⅱ(SEMG2)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
神經(jīng)纖維素2(NF2)elisa檢測試劑盒英文名稱:NF2 ELISA Kit,英文縮寫:NF2,產(chǎn)品別名:神經(jīng)纖維素2(NF2)ELISA檢測試劑盒,神經(jīng)纖維素2(NF2)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
伸展蛋白(SNPH)elisa檢測試劑盒英文名稱:SNPH ELISA Kit,英文縮寫:SNPH,產(chǎn)品別名:伸展蛋白(SNPH)ELISA檢測試劑盒,伸展蛋白(SNPH)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
溶質(zhì)載體家族30成員8(SLC30A8)elisa檢測試劑盒英文名稱:SLC30A8 ELISA Kit,英文縮寫:SLC30A8,產(chǎn)品別名:溶質(zhì)載體家族30成員8(SLC30A8)ELISA檢測試劑盒,溶質(zhì)載體家族30成員8(SLC30A8)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
醛脫氫酶1家族成員A2(ALDH1A2)elisa檢測試劑盒英文名稱:ALDH1A2 ELISA Kit,英文縮寫:ALDH1A2,產(chǎn)品別名:醛脫氫酶1家族成員A2(ALDH1A2)ELISA檢測試劑盒,醛脫氫酶1家族成員A2(ALDH1A2)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
親環(huán)素A(CYPA)elisa檢測試劑盒英文名稱:CYPA ELISA Kit,英文縮寫:CYPA,產(chǎn)品別名:親環(huán)素A(CYPA)ELISA檢測試劑盒,親環(huán)素A(CYPA)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個(gè)月。
HPDE細(xì)胞Mouse Anti-Guinea pig IgG/PE PE標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG規(guī)格 0.1ml
Mouse Anti-Guinea pig IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG規(guī)格 0.1ml
Mouse Anti-Guinea pig IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG規(guī)格 0.5ml
Mouse Anti-Guinea pig IgG/FITC FITC標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG規(guī)格 0.1ml
Mouse Anti-Guinea pig IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG規(guī)格 0.1ml
Mouse Anti-Guinea pig IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG規(guī)格 0.1ml
Mouse Anti-Guinea pig IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG規(guī)格 0.1ml
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