產(chǎn)品名稱:白血病阿霉素耐藥株
生長特性:懸浮生長
培養(yǎng)條件:RPMI-1640
傳代方法:1:2傳代
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產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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K562/Adr細胞
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T25
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FS-X3311
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公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘?,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
2,3-二吲哚 97%bFGF-9 ELISA Kit 大鼠堿性成纖維生長因子9豚鼠微球粒蛋白1(MCRS1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
5-氟吲哚酮 98%bFGF-4 ELISA Kit 大鼠堿性成纖維生長因子4豚鼠BTG3關(guān)聯(lián)核蛋白(BANP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
7-氟吲哚 98%bFGF-6 ELISA Kit 大鼠堿性成纖維生長因子6豚鼠骺蛋白聚糖(EPYC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
6-氟吲哚 98%aFGF-1 ELISA Kit 大鼠性成纖維生長因子1豚鼠抑瘤素M受體(OSMR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
5-氟吲哚 98%FASL ELISA Kit 大鼠凋亡相關(guān)因子配體豚鼠胱天蛋白酶4(CASP4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
4-氟吲哚 98%FAS/CD95 ELISA Kit 大鼠凋亡相關(guān)因子豚鼠DNA結(jié)合蛋白(DBP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
吲哚-7-羧 97%EPO ELISA Kit 大鼠紅**素豚鼠轉(zhuǎn)錄激活因子-5(ATF-5)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
吲哚-5-羧 98%EPOR ELISA Kit 大鼠紅**素受體豚鼠肝配蛋白A受體1 (EPHA1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
(RS)-1H-吲哚-2-羧 97%Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit 大鼠嗜粒趨化蛋白Eotaxin 1豚鼠白介素18(IL-18)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
二氫吲哚 99%ECF ELISA Kit 大鼠嗜粒趨化因子豚鼠神經(jīng)激肽B(NKB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
吲哚 CP,>98.5% (GC)EG-VEGF ELISA Kit 大鼠內(nèi)腺來源的血管內(nèi)皮生長因子豚鼠結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
異喹啉羧 98%1,3- BetaD-Glu ELISA Kit 大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶豚鼠無孢蛋白(ASPN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
1--3-吲哚 97%CD30 ELISA Kit 大鼠CD30分子豚鼠TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子13(TAF13)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
2-吲哚啉 99%E-Cad ELISA Kit 大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白豚鼠血管內(nèi)皮生長因子受體1(VEGFR1/Flt1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
吲哚-3-羧酯 99%BTC ELISA Kit 大鼠β素豚鼠蛋白酶3(PR3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
K562/Adr細胞腸激酶Elisa試劑盒軟骨寡聚質(zhì)蛋白抗原Mouse Anti-Bov IgG/AP 堿性酶(AP)標記的小鼠抗牛IgG
氧化低密度脂蛋白-β2 GPⅠElisa試劑盒天冬氨-胱氨特異性蛋白酶家族(抗原)Mouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的小鼠抗牛IgG
αL艾杜糖苷酶Elisa試劑盒半胱蛋白酶蛋白-3(抗原)Mouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的小鼠抗牛IgG
膜聯(lián)蛋白-A5Elisa試劑盒半胱蛋白酶蛋白-6(抗原)Mouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的小鼠抗牛IgG
庚型肝炎病IgM抗體Elisa試劑盒白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6(抗原)Mouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的小鼠抗牛IgG
α-胡蘿卜素Elisa試劑盒白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6(抗原)Mouse Anti-Bov IgG 小鼠抗牛IgG
γ-酚Elisa試劑盒半胱蛋白酶-10(抗原)MOSP/PTPMT1 線粒體蛋白酪氨酶1抗體
δ-酚Elisa試劑盒半胱蛋白酶蛋白-13(抗原)MOS 原癌因絲氨/蘇氨蛋白激酶MOS抗體
纖溶酶Elisa試劑盒CD19Morphine(C1F3) 單克隆抗體