產(chǎn)品名稱：高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞；MHCC97-H
形態(tài)特性：上皮樣

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

特征特性：來源于中山醫(yī)院，用人肝癌細(xì)胞株MHCC97-H接種裸鼠，進(jìn)行3次肺轉(zhuǎn)移篩選，取肺轉(zhuǎn)移瘤建成皮下接種后高度自發(fā)性肺轉(zhuǎn)移的肝癌細(xì)胞系

培養(yǎng)條件：DF+10%HS+5%FBS

傳代方法：1：2傳代

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)；

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

噁唑 98%SOD ELISA Kit  大鼠超氧化物歧化酶兔硫軟骨素(CS)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

2-噻吩乙酰 98%HSP gp96 ELISA Kit  大鼠熱休克蛋白糖蛋白96兔肌球蛋白重鏈10(MYH10)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

4-辛炔 99%CH50 ELISA Kit  大鼠血清總補(bǔ)體兔重組激活因2(RAG-2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

十八 ≥97.0% (GC)B7-2/sCD86 ELISA Kit  大鼠可溶性CD86兔血凝素(HA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

草酰 98%HIF-1 Alpha ELISA Kit  大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α兔血小板衍生生長(zhǎng)因子D(FDGFD)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

油 99%Amylin ELISA Kit  大鼠胰淀素兔唾液結(jié)合球蛋白樣凝集素8(SIGLEC8)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

油 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.0% (GC)LTC4 ELISA Kit  大鼠白三烯C4兔蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

1,7-辛二炔  98%Cyt-C ELISA Kit  大鼠色素C兔EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成酶抗體(EJ/GlyRS)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

十八烷 99%Ang- I ELISA Kit  大鼠血管緊張素Ⅰ兔生長(zhǎng)受體(GHR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

十八烷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.5% (GC)MC Ab ELISA Kit  大鼠黑色素抗體兔核糖核酶(RNASE)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

十八烷 Standard for GC, ≥99.5% (GC)DPP IV ELISA Kit  大鼠二肽肽酶Ⅳ兔胸腺嘧啶核苷化酶(TP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

酮三化膦 99%C4a ELISA Kit  大鼠過敏素/補(bǔ)體片斷4a兔蛋白酪氨酶受體K(PTPRK)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

丁位辛內(nèi)酯  98%C5a ELISA Kit  大鼠補(bǔ)體片斷5a兔胰島素降解酶(IDE)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

4-戊烯 95%C3a ELISA Kit  大鼠補(bǔ)體片斷3a兔GATA結(jié)合蛋白5(GATA5)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

鍺試劑 97%FS ELISA Kit  大鼠卵泡抑素兔前動(dòng)力蛋白受體1(PKR1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
MHCC97-H細(xì)胞轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族C成員1Elisa試劑盒PE-CY5標(biāo)記的驢抗豚鼠IgGMouse Anti-Rabbit IgM/PE  PE標(biāo)記的小鼠抗兔IgM

亮氨氨肽酶Elisa試劑盒APC標(biāo)記的驢抗豚鼠IgGMouse Anti-Rabbit IgM/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記的小鼠抗兔IgM

脂酰肌-4-Elisa試劑盒堿性酶（AP）標(biāo)記的驢抗豚鼠IgGMouse Anti-Rabbit IgM/Gold  膠體金標(biāo)記的小鼠抗兔IgM

黃素單氧化酶3Elisa試劑盒FITC標(biāo)記的驢抗豚鼠IgGMouse Anti-Rabbit IgM/FITC  FITC標(biāo)記的小鼠抗兔IgM

Slit同源蛋白3Elisa試劑盒羅丹明標(biāo)記的驢抗豚鼠IgGMouse Anti-Rabbit IgM/Cy7  Cy7標(biāo)記的小鼠抗兔IgM

D-葡萄糖Elisa試劑盒羅丹明標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗兔IgM

CD138分子Elisa試劑盒膠體金標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy5  Cy5標(biāo)記的小鼠抗兔IgM

可溶性活化因-3Elisa試劑盒FITC標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy3  Cy3標(biāo)記的小鼠抗兔IgM

自然殺傷家族2成員DElisa試劑盒堿性酶（AP）標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體Mouse Anti-Rabbit IgM/Bio  生物素標(biāo)記的小鼠抗兔IgM

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