公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

KI-67抗原(Ki-67)ELISA試劑盒甲咪唑煙酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品納米四氧化三鐵 99.5%,20nm 球形二苯甲酮腙(>98%,BR)

Jo1抗體/抗組氨酰tRNA合成酶抗體(Jo1/HRS)ELISA試劑盒甲基立枯磷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%納米二氧化鈦 99.8%,60nm,銳鈦，親水苯甲酸芐酯(>99%,BR)

IV形膠原蛋白α3鏈(COL4A3)ELISA試劑盒雙組份無吡啶滴定劑 5mg水/ml,測(cè)含水量較高樣品。 2瓶500毫升為烯硫 99%三丁基芐基溴化銨(>99%,BR)

IPO-38蛋白(IPO38)ELISA試劑盒雙組份無吡啶滴定劑 3mg水/ml,測(cè)常規(guī)樣品烯基基二硫 90%三丁基芐基氯化銨(>99%,BR)

Igγ3鏈C區(qū)(IGHG3)ELISA試劑盒雙組份無吡啶滴定劑 2mg水/ml,測(cè)含水量較低樣品2-乙酰吡咯 99%芐基三乙基氯化銨(>98%,BR)

ICOS配體(ICOSLG)ELISA試劑盒雙組份無吡啶滴定劑 1mg水/ml,測(cè)含水量較低樣品2-乙酰基-2-噻唑啉 97%4,4'-聯(lián)苯二甲酸(>98%,BR)

ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA試劑盒雙組份無吡啶溶劑 用作反應(yīng)介質(zhì)2,3-丁二硫 98%氯化鉍(>98%,BR)

I 型膠原蛋白(COL I)ELISA試劑盒容量法雙組份含吡啶溶液A 3mg水/1mlA+B,測(cè)定常規(guī)樣品雙 (2-甲基-3-呋喃基)二硫 98%檸檬酸鉍

H-鈣粘著蛋白/H-鈣粘連蛋白(H-Cad/CDH13)ELISA試劑盒單組份卡爾費(fèi)休試劑（測(cè)酮類樣 5mg水/ml，測(cè)水量較高樣品2,5-二甲基-2,5-二羥基-1,4-二噻烷 95%化鉍

G蛋白偶聯(lián)受體152(GPR152/PGR5)ELISA試劑盒單組份卡爾費(fèi)休試劑（測(cè)酮類樣 2mg水/ml，測(cè)水量較小樣品二糠基二硫 95%硫酸鉍(>98%,BR)

G蛋白偶聯(lián)受體109A(GPR109A)ELISA試劑盒單組份卡爾費(fèi)休試劑（測(cè)酮類樣 1mg水/ml，測(cè)水量微小樣品二糠基硫 98%堿式碳酸鉍

G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體1(GPBAR1)ELISA試劑盒單組份含吡啶卡爾費(fèi)休滴定劑 5mg水/ml，測(cè)水量較高樣品二基硫 98%水楊酸鉍

G蛋白偶聯(lián)雌受體1(GPR30)ELISA試劑盒單組份含吡啶卡爾費(fèi)休滴定劑 2mg水/ml，測(cè)含水量較低樣品基二硫 99%鉍粒(>99%,BR)

G蛋白偶合受體44(GPR44/CRTH2/DL1R)ELISA試劑盒單組份含吡啶卡爾費(fèi)休滴定劑 1mg水/ml，測(cè)含水量微小樣品4,5-二甲基-2-異丁基噻唑啉 97%β-萘氧乙酸鈉(植物級(jí))

GTP酶活化蛋白(GAP)ELISA試劑盒單組份滴定用溶劑(不含甲) 水分≤0.01%，用作反應(yīng)介質(zhì)2,5-二甲基-3-(2H)呋喃酮 98%Brij 56

GTP酶NRas(NRAS)ELISA試劑盒單組份油類測(cè)定用溶劑 水分≤0.01%，測(cè)礦物油2,5-二甲基-3-呋喃硫 1135921溴水（3%）
大鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞大腸埃希氏菌

種屬: Escherichia│coli

提供形式: 凍干物

**等級(jí): 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 312

生長(zhǎng)條件: 37℃

存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

鏈霉菌

種屬: Streptomyces│sp.

分離基物: 土壤

提供形式: 凍干物

**等級(jí): 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 0012

生長(zhǎng)條件: 28℃

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