公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。 

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒3-[(3-膽固氨基)二甲基氨基]-1-磺酸 98%吡啶-3，4-二羧酸 98%次硝酸鉍(>98%,BR)

胞漿球蛋白(CIg)ELISA試劑盒2-環(huán)己基乙磺酸 ≥99.0% (T)2,6-吡啶二甲 97%碳酸酐酶>3000U/mg

伴侶蛋白10(CPN10)ELISA試劑盒4-氯-7-硝基-2,1,3-苯并氧雜惡二唑 98%4-甲苯磺酰異酸酯 96%羧肽酶 B >170 U/mg

半乳糖凝集素7(Gal-7)ELISA試劑盒9，9-二甲基-2，7-二溴芴 98%2-(三氯乙酰)吡咯 99%碳酸鈷(II)(>98~102%,BR)

半乳糖凝集素3(Galectin3)ELISA試劑盒二硫蘇糖 99%鹽酸多巴 98%硝酸銅三水(>99%,BR)

半乳糖(Galactose)ELISA試劑盒二硫蘇糖 用于分子生物學(xué), ≥99%（±）-α-煙酸酚2'-脫氧脫氧胸苷-5'二磷酸三鈉鹽

半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA試劑盒二硫蘇糖 用于電泳, ≥99%反二酸 CP，99.0%半乳糖氧化酶(酶活：> 30 U/mg，BC)

半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒1,8-二氮-9-芴酮 99%碳酸胍 99%3-吲哚酸(>99%,植物級)

板層素相關(guān)多肽2亞型α(TMPO)ELISA試劑盒N,N'-二環(huán)己基-4-嗎啉脒 98%異抗壞血酸鈉 98%草酸亞鐵二水(>99%,BR)

瘢痕性天皰瘡抗體(CP)ELISA試劑盒DNA酶 ≥300 Kunitz units/mg protein三氧化二銻 SP硝酸鑭六水(>99%,BR)

白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒3,3'-二氨基聯(lián)苯 99%三氧化二銻 99.99% metals basis氯化鉛(>99%,BR)

白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒3,3'-二氨基聯(lián)苯 97%三氧化二銻 AR，99.5%檸檬酸鋰四水(>98%,BR)

白酯酶(LE)ELISA試劑盒2,7-二溴芴酮 96%三氧化二銻 99.9%，平均粒徑：0.7 μm4-甲基傘形酮酰-beta-D-吡喃糖苷

白調(diào)節(jié)素(LR)ELISA試劑盒2,6-二氯酚靛鈉鹽 AR三氧化二銻 99.999% metals basis4-甲基傘形酮酰-Β-D-吡喃葡糖酸苷

白球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)ELISA試劑盒3,5-二氯-2-羥基苯磺酸鈉 99%三氧化二銻 CP，99%4-甲基傘花基磷酸鈉三水

白抗原DR(HLA-DR)ELISA試劑盒 3,3'-二氨基聯(lián)苯四鹽酸鹽水合物 98%β-氨酸乙酯鹽酸鹽 98%萘(>98%，BC)
大鼠骨髓肥大細胞達松維爾擬諾卡氏菌達松維爾亞種

種屬: Nocardiopsis│dassonvillei subsp. dassonvillei

提供形式: 凍干物

**等級: 1

模式菌株: yes

應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株

培養(yǎng)基: 0038

生長條件: 28℃

羊布氏菌

種屬: Brucella│melitensis

提供形式: 凍干物

**等級: 3

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: **布氏P.I.抗原用于人　　粗糙　　　　突變株,強毒株

培養(yǎng)基: CM0112

生長條件: 37℃

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