公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷??1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。 

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒三乙基芐基氯化銨 98%4-溴吲哚 98%1,6-二磷酸果糖三鈉鹽(98-101.0%，BR)

單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒芐基三乙基溴化銨 98%氯苯靈 分析標(biāo)準(zhǔn)品，99%1,6-二磷酸果糖三鈉鹽(98-101.0%，BR)

單核趨化蛋白2(MCP-2)ELISA試劑盒18-冠-6 99%3-吲哚乙酸 98%銨(>99%，BR)

單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒15-冠-5 97%3-吲哚丁酸 98%四甲基對苯二鹽酸鹽(>99%，BR)

單核趨化蛋白1(MCP-1)ELISA試劑盒乙基三苯基化膦 95% 激動(dòng)素 99%1,3,5-三羥基苯二水合物(>98%，BR)

單氧化酶(MAO)ELISA試劑盒甲基三苯基溴化鏻 98%1-萘乙酸 96%碳酸無水(>98%，BR)

帶3蛋白(Band3)ELISA試劑盒四甲基化銨 98%8-氨基喹啉 98%?；撬?>98.5%，JP )

大皰性類天皰瘡抗體(BP)ELISA試劑盒四甲基氫氧化銨 AR,25%水溶液1-芐基哌 97%草酸銨(98~101%,BR)

大內(nèi)皮素(Big ET-1)ELISA試劑盒四丁基氯化銨 離子色譜級, ≥99.0%2-氯喹啉 98%二苯(BC)

大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA試劑盒四丁基氯化銨 97%8-羥基喹啉 AR,99.0%乙二四乙酸銅二鈉鹽(>98%,BR)

大腸菌素(colicin)ELISA試劑盒四乙基氫氧化銨 AR,25%水溶液8-羥基喹啉-5-磺酸 水合物 98%5'-單磷酸腺苷(>95%，BR)

大腸癌專一抗原4(CCSA-4)ELISA試劑盒四乙基氫氧化銨 AR,25%甲溶液8-羥基喹啉銅 94%硫酸鋁十六水(>98%,BR)

大腸癌專一抗原3(CCSA-3)ELISA試劑盒三鹽酸鹽 98%5-硝基-2-酚 98%葡萄糖-6-磷酸脫氫酶，硫酸銨懸浮液

大腸癌專一抗原2(CCSA-2)ELISA試劑盒四丁基氫氧化銨溶液 ～25% in H2O (～0.8 M)8-羥基喹啉半硫酸鹽 98%蘋果酸脫氫酶(>12,000U/ml，BC)

存活素抗體/生存蛋白(Surv)ELISA試劑盒四丁基氫氧化銨溶液 10% in H2O1，2-環(huán)己二 99%N-羥基丁二酰亞(>98%,BR)

脆性組氨酸三聯(lián)體(FHIT)ELISA試劑盒四丁基氫氧化銨溶液 ～25% in methanol (～0.8 M)4-溴苯乙 99%沒食子酸一水物(標(biāo)準(zhǔn)品)
ZJU-0430 細(xì)胞球形賴氨酸芽孢桿菌

種屬: Lysinibacillus│sphaericus

分離基物: 土壤

提供形式: 凍干物

**等級: 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 0002

生長條件: 30℃

釀膿鏈球菌

種屬: Streptococcus pyogenes

提供形式: 凍干粉

**等級: 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 哥倫比亞血平板

生長條件: 37℃，5%CO2 ，1-2天，乙型溶血，鏡檢為陽性鏈球菌，純

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