原代細(xì)胞培養(yǎng)就像是從種子開始種一棵樹，要把動(dòng)物組織從機(jī)體里取出來(lái)，經(jīng)過(guò)各種處理，讓細(xì)胞在培養(yǎng)基里生存、生長(zhǎng)和繁殖。

準(zhǔn)備材料和儀器：

儀器：培養(yǎng)箱（37℃）、培養(yǎng)瓶、吸管、離心機(jī)……

材料：動(dòng)物組織塊

試劑：1640培養(yǎng)基（含20%小牛血清）、0.25%胰酶、Hank's液等。

處理組織：

把組織塊放在燒杯里，用Hank's液洗2-3次，去掉血污。如果懷疑污染，就用青鏈霉素泡30-60分鐘。

剪切和消化：

用眼科剪把組織切成2-3毫米的小塊，然后加入胰蛋白酶液，放到37℃的溫箱里消化。每隔20分鐘搖一搖，直到細(xì)胞分散成團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞。??

分離和計(jì)數(shù)：

用篩子過(guò)濾掉沒(méi)消化開的組織塊，離心后吸出上清，加入培養(yǎng)液。用計(jì)數(shù)板數(shù)一數(shù)細(xì)胞密度，調(diào)整好后分裝到培養(yǎng)瓶里。

培養(yǎng)：

把培養(yǎng)瓶放到36.5℃的溫箱里，靜待細(xì)胞生長(zhǎng)。如果用CO?溫箱，記得用紗布或螺旋帽堵住瓶口。