植物乳桿菌復(fù)蘇步驟與注意事項(xiàng)：

  一、材料：

1.  常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)儀器設(shè)備 恒溫水浴振蕩器。

2.  培養(yǎng)液（DMEM）胎牛血清（CBS）二甲基亞砜（DMSO）。

二、操作程序：

1.  細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行常規(guī)消 毒，紫外照射40min以上。

2.  培養(yǎng)液（DMEM）、0.25％胰蛋白酶（Trypsin）恒溫水浴箱370C預(yù)熱20min，備用。

3.  二甲基亞砜（DMSO）在40C冰箱中冷藏30min，備用。

4.  從液氮保存罐中取出凍存管，立即放入400C水浴中，快速搖晃，直至凍存液*融化。

5.  將細(xì)胞懸液移入15ml離心管，緩慢加入4ml培養(yǎng)液，離心（1000r/min，5min）。

6.  用培養(yǎng)液懸液混懸沉淀細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞濃度，方培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

7.  記錄復(fù)蘇日期。