大多數(shù)原代貼壁細(xì)胞貼壁時(shí)間是6h到12h,細(xì)胞不貼壁有好多種原因的:
1、如果你用玻璃培養(yǎng)瓶培養(yǎng)的話,有可能你的瓶子沒處理好;建議你用一次性培養(yǎng)瓶,進(jìn)口的都可以。
2、一般做原代細(xì)胞貼壁培養(yǎng)用胰酶消化,消化的程度要掌握好,如果消化時(shí)間不到、分散不均勻不貼壁。一般消化有熱消化,就是放在37度里消化,時(shí)間比較短不好控制,傳代培養(yǎng)常用。還有就是冷消化放在4度里,一般在幾個(gè)小時(shí)以上,胰酶濃度也有要求的,一般都用0.125-0.25%之間。ph在7.6左右。
3、還有就是天然培養(yǎng)基的選擇,就是血清種類,血清能夠使細(xì)胞貼壁,并且提供細(xì)胞生長的重要營養(yǎng)成分。