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ELISA測(cè)定“邊緣效應(yīng)”的排除
以前在使用
96
孔板的
ELISA
測(cè)定中,常發(fā)現(xiàn)有
“
邊緣效應(yīng)
”
,即外周孔顯色較中心孔深,產(chǎn)生這種
“
邊緣效應(yīng)
”
的原因可能為
96
孔板周孔與中心孔表面或熱力學(xué)特征的不同。但有研究證實(shí)在溫育中的熱力學(xué)梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身為bu良熱導(dǎo)體,在實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)
ELISA
測(cè)定中,將板從室溫(通常在
25
℃
左右)置于
37
℃
溫箱,板也升溫時(shí),在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學(xué)梯度。因此使用水浴或在將反應(yīng)溶液加入至板孔中時(shí),將板和溶液均加熱至溫育溫度(如
37
℃
),就可以很容易地排除
“
邊緣效應(yīng)
”
,并且可提高測(cè)定的重復(fù)性。
總而言之,在臨床
ELISA
測(cè)定中,要保證好的測(cè)定效果,可采用下述簡(jiǎn)單辦法來(lái)確保溫育條件,即盡量采用水浴,溫育中讓微孔板浮于水面上,或?qū)⒔杆纳巢挤湃胍淮箫埡兄谐梢粷窈?,放于溫箱中,這樣就會(huì)因?yàn)榘鍡l孔底部直接與
37
℃
水或濕布的接觸,以及水浴箱或濕盒內(nèi)的高溫度,而使反應(yīng)溶液的溫度迅速與溫室平衡。
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