小鼠脂肪細胞傳代,細胞密度達到80-90%時即可傳代
1、棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗-2次; 2、加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化; 3、-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止; 4、將細胞懸液000RPM左右條件下離心4min,棄上清; 5、用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基; 6、懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。