反轉(zhuǎn)錄酶的選擇:
1. Money 鼠白血病病毒(MMLV)反轉(zhuǎn)錄酶:有強(qiáng)的聚合酶活性,RNA酶H活性相對較弱。作用溫度為37℃。
2.禽成髓細(xì)胞瘤病毒(AMV)反轉(zhuǎn)錄酶:有強(qiáng)的聚合酶活性和RNA酶H活性。作用溫度為42℃。
3.Thermus thermophilus、Thermus flavus等嗜熱微生物的熱穩(wěn)定性反轉(zhuǎn)錄酶:在Mn2+存在下,允許高溫反轉(zhuǎn)錄RNA,以消除RNA模板的二級結(jié)構(gòu)。
4.MMLV反轉(zhuǎn)錄酶的RNase H-突變體:商品名為Superscript 和SuperScriptⅡ。此種酶較其它酶能多將更大部分的RNA轉(zhuǎn)換成cDNA,這一特性允許從含二級結(jié)構(gòu)的、低溫反轉(zhuǎn)錄很困難的mRNA模板合成較長cDNA。