大鼠表皮調(diào)節(jié)素ELISA試劑盒實驗操作步驟:
1、將各種試劑移至室溫(18-25℃)平衡至少30分鐘,按前述方法配制試劑,備用。
2、加樣:分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔。每孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣本100μL,輕輕晃動混勻,覆上板貼,37℃溫育2小時
3、棄去液體,甩干,不用洗滌。
4、每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μL,覆上新的板貼,37℃溫育1小時。
5、 棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次。每次浸泡2分鐘,200μL/每孔,甩干。
6、每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液100μL,覆上新的板貼,37℃溫育1小時。
7、棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次。每次浸泡2分鐘,200μL/每孔,甩干。
8、 依序每孔加底物溶液90μL,37℃避光顯色15-30分鐘。
9、依序每孔加終止溶液50μL,終止反應(yīng)。
10、 在反應(yīng)終止后5分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。