產(chǎn)品描述
本品為使用大腸桿菌XL10菌株制備的化學(xué)轉(zhuǎn)化超級(jí)感受態(tài)細(xì)胞，轉(zhuǎn)化效率超過108 cfu/μg，廣泛適用于質(zhì)粒轉(zhuǎn)化、基因克隆、藍(lán)白斑篩選等用途。
XL10感受態(tài)細(xì)胞的基因型：Δ(mcrA)183Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lacTet rHte [F′proAB lacI qZΔM15 Tn10(Tet r) Amy Camr]
產(chǎn)品特性
1）XL10品系，具有四環(huán)素(Tetr)和氯霉素(Camr)抗性，新型克隆菌株。XL10 Chemically Competent Cell XL10化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
2）適合PCR產(chǎn)物、cDNA以及其他來源的非甲基化DNA的高效轉(zhuǎn)化。
3）endA1，RecA1突變，確保外源DNA在宿主菌中的穩(wěn)定性，有利于高質(zhì)量質(zhì)粒DNA提取。
4）Hte基因型，增強(qiáng)大片段DNA轉(zhuǎn)化效率，并使宿主菌細(xì)胞生長速度大幅度提高。
5）可用于對(duì)重組質(zhì)粒進(jìn)行藍(lán)白斑篩選。
6）轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC19 DNA。
7）無外源質(zhì)粒DNA殘留。
XL10 Chemically Competent Cell XL10化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
運(yùn)輸與保存方法
干冰運(yùn)輸。
XL10感受態(tài)細(xì)胞-80℃保存，pUC19質(zhì)粒-20℃保存。有效期半年。
注意事項(xiàng)
1）請(qǐng)勿將本品置于-20℃或液氮中保存
2）感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用。
3）待轉(zhuǎn)化DNA加入體積不要超過感受態(tài)細(xì)胞體積的1/10。
4）待轉(zhuǎn)化DNA加入感受態(tài)細(xì)胞后，請(qǐng)勿用移液槍吹打，輕輕彈勻即可。
5）為確保*高效率轉(zhuǎn)化，整個(gè)操作過程應(yīng)盡量輕柔。
6）為了您的健康，實(shí)驗(yàn)操作時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服和帶一次性手套。XL10 Chemically Competent Cell XL10化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
使用說明
1）將感受態(tài)細(xì)胞從-80℃中取出，置于冰水浴中融化。
2）將待轉(zhuǎn)化DNA加入到100 μl感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育30分鐘。
3）將離心管置于42℃水浴，不要晃動(dòng)，準(zhǔn)確熱激90秒后，立刻置于冰水浴中，靜置2-3分鐘。
4）向離心管中加入900 μl LB或SOC培養(yǎng)基，37℃水浴鍋中靜置10分鐘。
5）150 rpm, 37℃振蕩培養(yǎng)45分鐘，使菌體復(fù)蘇，抗性基因表達(dá)。
6）2,500 g離心5分鐘，去掉900 μl上清。用剩余培養(yǎng)基將菌體重懸，用無菌涂布棒在含有正確抗性的平板上輕輕涂勻。室溫正置10分鐘。待菌液被平板吸收后，37℃倒置培養(yǎng)過夜。
XL10 Chemically Competent Cell XL10化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞【注】：也可直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存，一周之內(nèi)都可重新涂板。
