小鼠調(diào)節(jié)活化的正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子檢測試劑盒

貨號(hào)HZC143.96

名稱Human RANTES ELISA kit

規(guī)格96T

靈敏度4pg/ml

檢測范圍7.8-500pg/ml

樣本類型血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清

樣本用量100 μl小鼠調(diào)節(jié)活化的正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子檢測試劑盒

類型雙抗體夾心法

人RANTES簡介：

RANTES，調(diào)節(jié)活化的正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的因子(Regulated upon Activation, Normal T cell Expressed and presumably Secreted) ，也稱為CCL5, 屬于趨化因子"CC"亞家族。RANTES 通過趨化白細(xì)胞并調(diào)控它們的功能，在炎癥**應(yīng)答中發(fā)揮重要作用。RNATES cDNA*初是通過抑制差減雜交法而鑒定出的T細(xì)胞特異性序列。人RANTES cDNA 編碼91個(gè)氨基酸殘基多肽前體分子，含有23個(gè)氨基酸殘基的疏水信號(hào)肽，經(jīng)剪切后產(chǎn)生一個(gè)68氨基酸殘基的成熟蛋白。小鼠調(diào)節(jié)活化的正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子檢測試劑盒人RANTES 與小鼠RANTES推測序列大約具有85%的同源性。RANTES對(duì)多種不同類型的細(xì)胞具有強(qiáng)的趨化作用，包括未刺激的CD4+/CD45RO+ 記憶性T細(xì)胞、活化的CD4+ T細(xì)胞、NK細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、肥大細(xì)胞、單核細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞。除其趨化作用外，RANTES也能活化多種類型的細(xì)胞包括T細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、NK細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞。T細(xì)胞的活化往往需要相對(duì)較高濃度的RANTES(1um),  依賴于與細(xì)胞表面氨基聚糖(GAGs)的凝集。目前已鑒定出4個(gè)RANTES 受體CCR1、CCR3、CCR4和CCR5，均為G蛋白偶聯(lián)受體。RANTES活化可激活多條信號(hào)傳導(dǎo)級(jí)聯(lián)。比如在T細(xì)胞內(nèi)，RABNTES可激活胞內(nèi)Ca2+升高，活化FAK激酶、蛋白激酶A、PI3K激酶、Rho GTP酶和JAK/STAT 信號(hào)通路。巨細(xì)胞病毒蛋白US28 與CC趨化因子受體具有高度的同源性，可與RNATES結(jié)合。

操作注意事項(xiàng)：

◆實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

◆酶標(biāo)包被板開封后如未用完，應(yīng)把小鼠調(diào)節(jié)活化的正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子檢測試劑盒立即裝入密封袋中加干燥劑保存。

◆建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照都做雙份檢測，取平均值，以減小實(shí)驗(yàn)誤差。

◆若顯色過淺，可適當(dāng)延長底物溫育時(shí)。

◆標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測。如有**污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。保存過久可發(fā)生聚合在ELISA中可使本底加深。

◆凍結(jié)標(biāo)本溶解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛混合，不要在混勻器上強(qiáng)烈震蕩。

◆渾濁或有沉淀的標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測。

◆反復(fù)凍融會(huì)使蛋白效價(jià)降低，所以代測樣本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。