ELISA試劑盒注意事項(xiàng)和操作過(guò)程

ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
1.  此試劑為體外檢測(cè)試劑，效期內(nèi)運(yùn)用，試劑應(yīng)視為感染物，不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2．運(yùn)用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘，
3．濃縮洗刷液呈現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4．濃縮樣品稀釋液呈現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5．若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)，標(biāo)本可存放于2～8℃。不需及時(shí)試驗(yàn)，標(biāo)本-20℃保存，防止反復(fù)凍融。
6．在反復(fù)清洗微孔板，并扣干微孔中的殘余液體，否則將下降**度，造成吸光度違背的假像。
7．加樣結(jié)束后，應(yīng)注意細(xì)微搖擺微孔反響條，以便使孔中的液體充沛混勻。
8．試劑盒保存于2～8℃，請(qǐng)勿冷凍，有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)明。

ELISA試劑盒操作過(guò)程
1．取出酶標(biāo)板，設(shè)空白孔，按照次第對(duì)應(yīng)別離參加100μl的規(guī)范品于空白微孔中（空白孔視為0號(hào)規(guī)范品，用醫(yī)用

蒸餾水代替）
2、別離標(biāo)記樣品編號(hào)，參加100μl的稀釋樣品于空白微孔中（不同的樣本選用不同的吸頭）。
3、將酶標(biāo)板置于37℃溫育30分鐘；
4、將酶標(biāo)板板取出，將其間的液體甩去，每個(gè)孔中悉數(shù)加滿(mǎn)使用洗刷液后，當(dāng)即甩去液體;
5、每個(gè)孔中加滿(mǎn)使用洗刷液后，細(xì)微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的使用洗刷液甩去，在吸水紙大將酶標(biāo)板拍干。
6、重復(fù)第5個(gè)過(guò)程5次，在吸水紙大將酶標(biāo)板拍干。
7、在規(guī)范品孔和樣品孔中參加100μl的酶標(biāo)巧合溶液。
8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。
9、將酶標(biāo)板取出，將其間的液體甩去，每個(gè)孔中悉數(shù)加滿(mǎn)使用洗刷液后，當(dāng)即甩去液體。
10、每個(gè)孔中再次加滿(mǎn)洗刷使用液后，室溫細(xì)微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的使用洗刷液甩去，在吸水紙大將酶標(biāo)板

拍干。
11、重復(fù)第5個(gè)過(guò)程5次，在吸水紙大將酶標(biāo)板拍干。
12、在每個(gè)孔中參加底物A 50μl后當(dāng)即參加底物B 50μl。悄悄振動(dòng)混勻。（A液、B液選用不同的吸頭加樣）
13、將酶標(biāo)板置于37℃避光溫育反響15分鐘。
14、每個(gè)微孔中參加50μl的停止液，悄悄振動(dòng)混勻。
15、在酶標(biāo)儀上，450nm處測(cè)定OD; 顯色后，15分鐘內(nèi)進(jìn)行測(cè)定。
16、依據(jù)制備的規(guī)范曲線，核算樣本含量