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冷凍保存細(xì)胞的凍結(jié)與復(fù)蘇要點(diǎn)

發(fā)布時間:2018-05-24

冷凍保存細(xì)胞的凍結(jié)與復(fù)蘇要點(diǎn)

冷凍保存細(xì)胞的凍結(jié)與復(fù)蘇要點(diǎn):慢凍快融
(1)凍結(jié)操作過程動作要輕。由于冷凍保存過的細(xì)胞變得十分軟弱,不只凍結(jié)速度要快,而且動作要輕。一般情況
下,凍結(jié)后的細(xì)胞可直接接種到含徹底成長培育液的細(xì)胞培育瓶中直接進(jìn)行培育(1ml 凍存細(xì)胞液加入到 25-30ml 
徹底培育液中),24 小時后再用新鮮徹底培育替換舊培育液,以去除 DMSO。假如,細(xì)胞對冷凍保護(hù)劑特別靈敏,
那么,凍結(jié)后的細(xì)胞應(yīng)先經(jīng)過離心去除冷凍保護(hù)劑,然后再接種到含徹底成長培育液的培育瓶中。
(2)快速凍結(jié)。凍存細(xì)胞從液氮中取出后,應(yīng)立即放入 37℃水浴中,悄悄搖動冷凍管,使其在 1 分鐘內(nèi)悉數(shù)消
融(不要超越 3 分鐘)。
特別留意:
(1)凍結(jié)時必須留意**,防止冷凍管爆裂。,要帶手套,用鑷子將細(xì)胞冷凍管從液氮中取出,放入 37℃水浴
中。切不行直接用手,避免**。
(2)冷凍管在水浴中凍結(jié)時,要將凍存管蓋子擰緊,斷定擰緊后再投入水浴鍋中,留意液面不行超越凍存管蓋面,
不然,易發(fā)作污染。

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