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冰凍切片組織取材的問(wèn)題

發(fā)布時(shí)間:2017-06-21

冰凍切片組織取材的問(wèn)題

我的組織處理方法如下:


1)取出內(nèi)臟后,去離子水漂洗3次左右,洗去表面的血,然后擦干。


2)OTC包埋。


3)放進(jìn)-80°C冰箱直接速凍。


然后想詢問(wèn)下各位戰(zhàn)友一些問(wèn)題:


1.取出內(nèi)臟后,為了避免更多冰晶的產(chǎn)生,能否不漂洗,直接擦干血跡然后包埋?這樣做會(huì)不會(huì)有很多紅細(xì)胞附著在組織切片上面?


2.直接進(jìn)行-80°C速凍,速凍時(shí)長(zhǎng)和冰晶產(chǎn)生的多少有關(guān)聯(lián)嗎?


3.肝、腎組織切片能直接速凍就切嗎(主要是老板說(shuō)他當(dāng)年切的時(shí)候,直接速凍就切出來(lái)了,我試過(guò)脫水、速凍等辦法都沒(méi)出到能用的圖,被罵得很慘。。。)

灌注固定了嗎?如果沒(méi)有事前固定,那后期取材動(dòng)作要快,取材后馬上先固定下再脫水(沒(méi)有及時(shí)固定的話抗原會(huì)降解),肝腎組織含水量比較大,容易有冰晶產(chǎn)生,脫水完成后OCT包埋(OCT完全變白后馬上終止液氮速凍)

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