TUNEL 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒

TUNEL 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒是采用非同位素方法來(lái)檢測(cè)細(xì)胞在凋亡過(guò)程中DNA 的斷裂情況，可在原位快速準(zhǔn)確地檢測(cè)單個(gè)凋亡細(xì)胞。本試劑盒適用于組織樣本（石蠟包埋、冰凍和超薄切片）和細(xì)胞樣本（細(xì)胞涂片）的凋亡原位檢測(cè)。

     其原理是細(xì)胞凋亡發(fā)生時(shí)，內(nèi)源性核酸酶激活，使DNA的雙鏈斷裂或一條鏈出現(xiàn)缺口，產(chǎn)生一系列3’-OH末端，在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶（TdT）作用下，組織細(xì)胞原位DNA切口可被標(biāo)記上生物素-dUTP，即TUNEL（Terminal deoxynucleotidyl Transferase Biotin-dUTP Nick End Labeling），可與連接了的辣根過(guò)氧化酶的鏈霉親和素（Streptavidin-HRP）特異結(jié)合，在辣根過(guò)氧化酶底物二氨基聯(lián)苯胺（DAB）的存在下，顯示為棕色（過(guò)氧化物酶活性），特異準(zhǔn)確地定位正在凋亡的細(xì)胞，在普通顯微鏡下即可觀察和計(jì)數(shù)凋亡細(xì)胞；由于正的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒(méi)有DNA 的斷裂，因而沒(méi)有3'-OH 形成，很少能夠被染色。

TUNEL 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒

       組   份         10 assays             25 assays               儲(chǔ)存條件

 

A：Equilibration Buffer     1.0 mL             2.5 mL                   -20 ℃

B：Biotinylated Nucleotide Mix 10 μL         25 μL                  -20 ℃

C：TdT Enzyme          10 μL              25 μL                  -20 ℃

D：500×Proteinase K     10 μL              25 μL                  -20 ℃

       20×SSC          15 mL              38 mL                     4 ℃

E：Streptavidin-HRP       10 μL             25 μL                    4 ℃

F：20×DAB Substrate Buffer 50 μL          125 μL                    4 ℃

G：20×DAB Chromogen   50 μL            125 μL                    4 ℃

H：20×Hydrogen Peroxide 50 μL           125 μL                     4 ℃

 

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