什么類型的細胞系可以在NUNC Lab-Tek 腔室載玻片、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶和蓋玻片上生長?
大部分貼壁細胞系和纖維細胞系都可以在NUNC細胞培養(yǎng)產(chǎn)品上良好生長,而且原代細胞也能很好的在NUNC細胞培養(yǎng)產(chǎn)品上生長。
什么原因可能導致細胞生長**和粘附較差?
很多因素都可能導致細胞生長**和粘附較差,其中有細胞類型、細胞代齡、培養(yǎng)條件、培養(yǎng)環(huán)境、營養(yǎng)成分、**、細胞培養(yǎng)步驟、細胞處理和表面選擇等。細胞培養(yǎng)中細胞系代齡和傳代次數(shù)將是非常重要的參數(shù),傳代次數(shù)表示細胞被再培養(yǎng)的次數(shù)。一些細胞經(jīng)過幾次的傳代,細胞形態(tài)可能發(fā)生變化。隨著細胞傳代老化,細胞*后就會停止分裂生長,同時隨著細胞培養(yǎng)時間的延長細胞可能發(fā)生自傳染導致細胞變異。
細胞培養(yǎng)過程中的胰酶處理會損壞細胞膜,使細胞的粘附性和叢生化等變差, 時間延長內(nèi)**也會積累,營養(yǎng)物質(zhì)降低,培養(yǎng)條件的輕微變化都會導致細胞生長變差。
那些原因會導致在顯微鏡下觀察細胞時得不到好的實驗結(jié)果?
指印和油污染鏡頭是導致觀察結(jié)果**的*普通的原因,使用顯微鏡前將物鏡清洗干凈并一直浸入油中十分必要,特別使用油鏡浸入時使用專門品牌的觀察用油非常重要。
蓋玻片和載玻片的選擇不當也可能導致較差的試驗結(jié)果,推薦使用No. 1 和 No. 1.5硼酸玻璃蓋玻片能得到*佳效果。使用塑料載玻片由于玻璃和塑料折射率的不同在較高放大倍數(shù)下也可能影響實驗結(jié)果,玻璃的厚度對能否得到較好觀察圖片也非常重要,例如No. 2圓蓋玻片如果要得到高質(zhì)量圖片就顯得太厚了。參考顯微鏡說明書查找*佳耗材配置。
The coverslipping procedure may affect resolution. A clear seal isrequired, free of debris and particles. When performing oil immersion, bubbles may result inpoor resolution under high magnification.
什么因素可能導致細胞系不能在NUNC培養(yǎng)產(chǎn)品上生長?
好多因素都可能影響細胞的粘附和生長,細胞生長較差可能是一下因素中的一種或者多種:
l 培養(yǎng)條件例如溫度、培養(yǎng)基pH值、濕度和CO2 和O2 濃度;
l 微生物的污染(**、酵母和霉菌),抗生物使用可以降低污染幾率。細胞也可能被一些看不見的物質(zhì)污染,病毒和支原體是*為常見的,而且支原體的監(jiān)測是非常困難的,所以使用血清必須向有無支原體認證的企業(yè)購買;
l 培養(yǎng)基的成分對有些細胞系可能也是有毒性;
l 培養(yǎng)器皿上的去污劑殘留也可能影響細胞的粘附,去污劑殘留可能是有毒性的,導致細胞膜或者細胞蛋白的溶解;
l 有些細胞需要額外的基質(zhì)來促進生長,包括膠原、昆布安酸、粘連蛋白和聚賴氨酸等。有些細胞系需要加入額外的細胞因子例如細胞色素和神經(jīng)生長因子;
l 查閱細胞庫中獲取細胞系的特殊信息。
原代細胞培養(yǎng)中什么原因可能導致細胞死亡?
原代細胞比移植細胞更為脆弱,因為細胞必須從周圍的組織中抽提出來,消化酶選擇、消化時間長短和酶的去除對細胞活力和健康程度都非常重要。
NunclonΔ表面都經(jīng)過了什么試劑包被?
Nunc細胞培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板、培養(yǎng)皿、多孔板、Permanox Lab-Tek 腔室玻片和培養(yǎng)管沒有經(jīng)過任何生化試劑包被,NunclonΔ表面是經(jīng)過特殊表面修飾,增強了細胞的粘附性和細胞生長能力。
Nunc細胞刮刀刀刃是柔軟的還是剛性的?是由什么材料做成?
Nunc細胞刮刀是剛性的,由聚乙烯制成,鉸鏈處可以根據(jù)客戶使用情況調(diào)整成不同角度,可以刮搽細胞。
Nunc細胞刮刀能否在NunclonΔ三層細胞瓶中使用?
不能,三層細胞培養(yǎng)瓶的不是為機械刮搽設計,但是細胞也是非常容易收獲,可以通過胰酶、膠原酶、蛋白酶或者非酶溶液處理細胞,具體請參看Tech Note Vol. 1 No. 2 關(guān)于Nunclon Δ TripleFlask細胞培養(yǎng)技術(shù)手冊。