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柴油機廢氣對A549細胞暴露毒理評價

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點擊量: 226423 來源: 北京佰樂良成科技有限公司
柴油機已經(jīng)廣泛應(yīng)用于交通運輸、工業(yè)制造以及**國防等領(lǐng)域。柴油機排放物(DE)中含有包括氣態(tài)和顆粒相在內(nèi)的各種化學(xué)成分,其中微粒物質(zhì)(PM)和二氧化氮(NO2)是濃度*高的成分,相比于苯,醛和多環(huán)類芳香烴(PZHs)。
有研究顯示,柴油排放物對實驗動物(包括培養(yǎng)細胞)影響的主要物質(zhì)是其中的微粒物質(zhì)(PM)。每一代新的柴油機標準也都逐漸減小了PM和NOX的排放量,然而柴油機排放物對健康影響的評估終究需要有系統(tǒng)的進行研究,包括流行病學(xué)、動物實驗。日本汽車研究所能量與環(huán)境研究中心Naomi Tsukue,首先利用Cultex體外暴露技術(shù),對體外培養(yǎng)肺腺癌細胞A549進行了柴油機排放物暴露毒理的評價研究。
分別采用三組不同組分比例的實驗的柴油機排放物(DE)對A549細胞進行暴露,**組(Group I)為低PM濃度,高NO2濃度、**組(Group II)為高PM濃度,高NO2濃度、第三組(Group III)為高PM濃度,低NO2濃度。每組DE被稀釋成1:100或1:10的濃度與空氣濃度做對照。三組DE分別對在37℃溫度培養(yǎng)下的肺腺癌細胞A549進行60分鐘的直接暴露(暴露過程中細胞所需的37℃恒定溫度、不斷流動的培養(yǎng)液Cultex體外暴露模塊并控**控制氣體流量),然后分別進行細胞活性分析、實時定量PCR基因分析以及DNA基因芯片分析,*后對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。
      Cell viability assay
     
        Real-time quantitative polymerase chain reaction (PCR)
  
        
       DNA microarray analysis
    
   
Changes of gene expressions of A549 cell after exposure to DE by DNA microarray

      
      
Genes commonly up-regulated in all groups by DNA microarray   
            
The top ten of genes commonly up-regulated at the 1:100 dilution of Group II by DNA microarray.
      
柴油機廢氣對A549細胞暴露毒理評價數(shù)據(jù)結(jié)果顯示,高濃度NO2對肺腺癌細胞A549的毒性更強,影響細胞存活率的是NO2而非PM.因為NO2具有氧化應(yīng)激性,HO-1 mRNA表達量的增加可能受這一因素影響。