浮游菌的測(cè)試方法
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了醫(yī)藥工業(yè)潔凈室和潔凈區(qū)中浮游菌測(cè)試條件、測(cè)試方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于醫(yī)藥工業(yè)潔凈室和潔凈區(qū)，無(wú)菌室或無(wú)菌區(qū)域（包括潔凈工作臺(tái)）的浮游菌的測(cè)定和環(huán)境的驗(yàn)證
4 測(cè)試方法
4.1 方法提要
本方法采用計(jì)數(shù)濃度法，即通過(guò)收集懸游在空氣中的生物性粒子于專(zhuān)門(mén)的培養(yǎng)基，經(jīng)若干時(shí)間，在適宜的生長(zhǎng)條件下讓其繁殖到可見(jiàn)的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，從而判定潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中的活微生物數(shù)，以此來(lái)評(píng)定潔凈室（區(qū)）的潔凈度。
4.2 所用的儀器、設(shè)備和培養(yǎng)基
a）浮游菌采樣器；
b）真空抽氣泵；
c）培養(yǎng)皿；
d）培養(yǎng)基；
e）恒溫培養(yǎng)箱。
4.3 浮游菌采樣器
浮游菌采樣器宜采用撞擊法機(jī)理的采樣器，一般采用狹縫式采樣器或離心式采樣器。
4.3.1 采用的浮游菌采樣器必須要有流量計(jì)和定時(shí)器。
4.3.2 狹縫式采樣器的原理
狹縫式采樣器由附加的真空抽氣泵抽氣，通過(guò)采樣器的縫隙式平板，將采集的空氣噴射并撞擊到緩慢旋轉(zhuǎn)的平板培養(yǎng)基表面上，附著的活微生物粒子經(jīng)培養(yǎng)后形成菌落，予以計(jì)數(shù)。
4.3.3 離心式采樣器的原理
離心式采樣器由于內(nèi)部風(fēng)機(jī)的高速旋轉(zhuǎn)，氣流從采樣器前部吸入從后部流出，在離心力的作用下，空氣中的活微生物粒子有足夠的時(shí)間撞擊到專(zhuān)用的固形培養(yǎng)條上，經(jīng)培養(yǎng)后形成菌落，予以計(jì)數(shù)。
4.3.4 狹縫式采樣器的使用要點(diǎn)
應(yīng)嚴(yán)格按儀器說(shuō)明書(shū)的要求進(jìn)行操作。
4.3.4.1 校驗(yàn)
采樣器必須按儀器的檢定周期，定期對(duì)儀器作檢定，以保證測(cè)試數(shù)據(jù)的可靠性。校驗(yàn)的項(xiàng)目有：定時(shí)器、轉(zhuǎn)盤(pán)轉(zhuǎn)速、流量計(jì)。
4.3.2 每次測(cè)試前應(yīng)按說(shuō)明書(shū)上的規(guī)定，先接通電源，啟動(dòng)真空抽氣泵，然后調(diào)節(jié)流量計(jì)及定時(shí)器。
4.3.4.3 空氣采樣量根據(jù)需要選定。已知采樣器的流量（L/min），設(shè)定采樣時(shí)間（min），兩者相乘即采樣量（L）。
4.3.4.4 注意事項(xiàng)
4.3.4.4.1 采樣口必須用便于**及化學(xué)性能穩(wěn)定的材料制造。
4.3.4.4.2 采樣管?chē)?yán)禁滲漏，內(nèi)壁應(yīng)光滑。
4.3.4.4.3 采樣管的長(zhǎng)度應(yīng)根據(jù)測(cè)點(diǎn)的高度定，盡量減少?gòu)澢?/p>
4.4 真空抽氣泵
4.4.1 真空抽氣泵的排氣量應(yīng)與采樣器匹配。
4.4.2 宜采用無(wú)油真空抽氣泵，必要時(shí)可在非氣口安裝氣體過(guò)濾器。
4.4.3 真空抽氣泵安裝的位置必須適當(dāng)，一般裝在采樣器下面。
4.5 培養(yǎng)皿
4.5.1 狹縫式采樣器一般采用Æ 150mm×15mm、Æ 90mm×15mm、Æ65mm×15mm三種規(guī)格的硼硅酸玻璃培養(yǎng)皿。可根據(jù)所選用采樣器選擇合適的培養(yǎng)皿。
4.5.2 離心式采樣器采用專(zhuān)用的固形培養(yǎng)條。
4.6 培養(yǎng)基
普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基或其他藥典認(rèn)可的培養(yǎng)基。其配制方法見(jiàn)附錄A（標(biāo)準(zhǔn)的附錄）。
4.7 恒溫培養(yǎng)箱
必須定期對(duì)培養(yǎng)箱的溫度計(jì)進(jìn)行檢定。
4.8 測(cè)試步驟
4.8.1 測(cè)試前儀器、培養(yǎng)皿表面必須嚴(yán)格**。
4.8.1.1 采樣器進(jìn)入被測(cè)房間前先用**房間的**劑**，用于100級(jí)潔凈室的采樣器宜一直放在被測(cè)房間內(nèi)。
4.8.1.2 用**劑擦凈培養(yǎng)皿的外表面。
4.8.1.3 采樣前，先用**劑**采樣器的頂蓋、轉(zhuǎn)盤(pán)以及罩子的內(nèi)外面，采樣結(jié)束，再用**劑輕輕噴射罩子的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤(pán)。
4.8.1.4 采樣口及采樣管，使用前必須高溫**。如用**劑對(duì)采樣管的外壁及內(nèi)壁進(jìn)行**時(shí)，應(yīng)將管中的殘留液倒掉并晾干。
4.8.1.5 采樣者應(yīng)穿戴與被測(cè)潔凈區(qū)域相應(yīng)的工作服，在轉(zhuǎn)盤(pán)上放入或調(diào)換培養(yǎng)皿前，雙手用**劑**。
4.8.2 狹縫式采樣器的采樣程序
4.8.2.1 儀器經(jīng)**后先不放入培養(yǎng)皿，開(kāi)動(dòng)真空泵抽氣，使儀器中的殘余**劑蒸發(fā)，時(shí)間不少于5min，并調(diào)好流量、轉(zhuǎn)盤(pán)轉(zhuǎn)速。
4.8.2.2 關(guān)閉真空泵，放入培養(yǎng)皿，蓋上蓋子后調(diào)節(jié)采樣器縫隙高度。
4.8.2.3 置采樣口于采樣點(diǎn)后，依次開(kāi)啟采樣器、真空泵，轉(zhuǎn)動(dòng)定時(shí)器，根據(jù)采樣量設(shè)定采樣時(shí)間。
4.8.3 培養(yǎng)
4.8.3.1 全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.8.3.2 在30℃～35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于48h。
4.8.3.3 每批培養(yǎng)基應(yīng)有對(duì)照試驗(yàn)，檢驗(yàn)培養(yǎng)基本身是否污染?？擅颗x定3只培養(yǎng)皿作對(duì)照培養(yǎng)。
4.8.4 菌落計(jì)數(shù)
4.8.4.1 用肉眼直接計(jì)數(shù)、標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì)，然后用5～10倍放大鏡檢查，有否遺漏。
4.8.4.2 若平板上有2個(gè)或2個(gè)以上的菌落重疊，可分辨時(shí)仍以2個(gè)或2個(gè)以上的菌落計(jì)數(shù)。
4.8.5 注意事項(xiàng)
4.8.5.1 使用前仔細(xì)檢查每個(gè)培養(yǎng)皿的質(zhì)量，培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿有變質(zhì)、破損或污染的不能使用。
4.8.5.2 采取一切措施防止采樣管的污染和其他人為對(duì)樣本的污染。
4.8.5.3 對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細(xì)的記錄。
4.8.5.4 由于**種類(lèi)繁多，差別甚大，計(jì)數(shù)時(shí)一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì)觀察，不要漏計(jì)培養(yǎng)皿邊緣生長(zhǎng)的菌落，并須注意***落或培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必要時(shí)用顯微鏡鑒別。
5 測(cè)試規(guī)則
5.1 測(cè)試狀態(tài)
5.1.1 浮游菌測(cè)試前，被測(cè)試潔凈室（或潔凈區(qū)）溫、濕度須達(dá)到規(guī)定的要求，靜壓差、換氣次數(shù)、空氣流速必須控制在規(guī)定值內(nèi)。
5.1.2 浮游菌測(cè)試前，被測(cè)試潔凈室（或潔凈區(qū)）已經(jīng)過(guò)**。
5.1.3 測(cè)試狀態(tài)有靜態(tài)和動(dòng)態(tài)兩種，測(cè)試狀態(tài)的選擇必須符合生產(chǎn)的要求，并在報(bào)告中注明測(cè)試狀態(tài)。
5.2 測(cè)試人員
5.2.1 測(cè)試人員必須穿戴符合環(huán)境級(jí)別的工作服。
5.2.2 靜態(tài)測(cè)試時(shí)，室內(nèi)測(cè)試人員不得多于2人。
5.3 測(cè)試時(shí)間
5.3.1 對(duì)單向流，如100級(jí)凈化房間及層流工作臺(tái)，測(cè)試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于10 min后開(kāi)始。
5.3.2 對(duì)非單向流，如10 000級(jí)，100 000級(jí)以上的凈化房間，測(cè)試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于30min后開(kāi)始。
5.4 浮游菌濃度計(jì)算
5.4.1 采樣點(diǎn)數(shù)量及其布置
5.4.1.1 *少采樣點(diǎn)數(shù)目浮游菌的測(cè)試方法
公安機(jī)關(guān)備案號(hào)：
