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方法一：稱取試樣10克(±0.01g)于容量瓶中,加流動(dòng)相溶液100ml溶解,超聲提取30min靜置,取上層，8000轉(zhuǎn)高速離心，取上層過0.45濾膜備用。方法二：稱取試樣10克(±0.01g)于容量瓶中,加50%乙腈—水溶液100ml溶解，超聲提取30min靜置,取上層，5000轉(zhuǎn)高速離心，取上層過0.45濾膜備用。方法三：稱取試樣5克((±0.01g)，加15ml1%三***，超聲提取30min，8000轉(zhuǎn)高速離心，上層用濾紙濾過，將樣品上活化的MCX柱(OasisMCX3cc/60mg，PN：186000254)，用3ml水，3ml甲醇，抽干，5%氨水甲醇溶液3ml洗脫，蒸干，用2：8甲醇—水定容，過0.45um濾膜，備用。方法四：標(biāo)樣：取50mg三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品，以20%甲醇溶解定容至50ml得到1000ppm的標(biāo)準(zhǔn)溶液，使用時(shí)，以提取液(0.1%三***)稀釋到所要的濃度.提取:稱取樣品5g,加入50ml0.1%三***提取液,充分混勻,加入2ml2%乙酸鉛溶液,超聲20min.然后取部分溶液轉(zhuǎn)移至10ml離心管

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1前言依據(jù)GB/T22388&mdash;2008原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測(cè)方法，本文提供了LC98-II型高效液相色譜儀(HPLC)對(duì)原料乳及乳制品中三聚氰胺的高效液相色譜(HPLC)檢測(cè)方法。2范圍GB/T22388&mdash;2008原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測(cè)方法中，提出高效液相色譜法的定量限為2mg/kg，液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法的定量限為0.01mg/kg。而本文所提供的LC98-II型高效液相色譜儀(HPLC)對(duì)原料乳與乳制品中三聚氰胺的定量檢測(cè)限可達(dá)0.05mg/kg。3高效液相色譜法3.1原理試樣用三***溶液-乙腈提取，經(jīng)陽離子交換固相萃取柱凈化后，用高效液相色譜測(cè)定，外標(biāo)法定量。3.2試劑與材料均按GB/T22388&mdash;2008原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測(cè)方法的3.2操作。3.3儀器和設(shè)備3.3.1LC98-II型高效液相色譜儀(北京溫分分析儀器技術(shù)開發(fā)有限公司)：配有P98-II型高壓輸液泵及UV98-II型紫外檢測(cè)器。3.3.2分析天平：感量為0.0001g和0.01g。3.3.3離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于4000r/min。3.3.4超聲波水浴。3.3.

三聚氰胺簡(jiǎn)稱三胺、氰脲酰胺，是一種用途廣泛的具有氮雜環(huán)結(jié)構(gòu)的有機(jī)化工原料，因其結(jié)構(gòu)中還有多個(gè)氨基氮，而目前對(duì)蛋白的定量主要依靠凱式定氮，因而三聚氰胺被一些不法商販添加到蛋白中以提高蛋白檢測(cè)中氮的含量。2007年3月美國(guó)發(fā)生的貓狗寵物非正常死亡事件以及*近國(guó)內(nèi)的奶粉事件都是由此造成的。目前，檢測(cè)三聚氰胺的主要方法是HPLC、LC-MS、GC-MS，但對(duì)儀器及實(shí)驗(yàn)室要求較高，樣品處理和操作也相對(duì)要求較高。相對(duì)而言，檢測(cè)試劑盒操作方便，且不需要大筆的儀器投入，同時(shí)也具有很好的靈敏度。這類試劑盒多采用直接競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)**檢測(cè)(ELISA)，對(duì)UD和60%甲醇兩種方法處理樣品所獲得的三聚氰胺萃取液進(jìn)行**測(cè)定可以獲得相同的結(jié)果，可用來定量檢測(cè)被污染樣品中的三聚氰胺。檢測(cè)原理：三聚氰胺檢測(cè)試劑盒是競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)**反應(yīng)。三聚氰胺從樣品中萃取出來。三聚氰胺-HRP，樣品萃取液和標(biāo)準(zhǔn)品一起加入包備有三聚氰胺抗體的微孔中發(fā)生反應(yīng)，經(jīng)過30分鐘的培養(yǎng)，樣品中的三聚氰胺和三聚氰胺-HRP與三聚氰胺抗體競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，任何沒有結(jié)合的三聚氰胺和三聚氰胺-HRP將被沖洗掉，顯色酶底物加入微孔中，任何結(jié)合的三聚氰胺-HRP都

三聚氰胺是一種化工原料，在奶粉、蛋白粉等食品或飼料中添加三聚氰胺可以造成蛋白質(zhì)含量達(dá)標(biāo)的假象。因此，三聚氰胺也被稱為&ldquo;蛋白精&rdquo;，大量攝入會(huì)損害人體健康。2008年10月7日，國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局與標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)聯(lián)合發(fā)布了《原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測(cè)方法》，即國(guó)標(biāo)GB/T22388-2008。這一新標(biāo)準(zhǔn)制定了高效液相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法及氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法三種檢測(cè)方法與標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)明確檢測(cè)對(duì)象及其限量。三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖GB/T22388&mdash;2008檢測(cè)方法專用標(biāo)樣及配套產(chǎn)品產(chǎn)品編號(hào)產(chǎn)品名稱規(guī)格價(jià)格CAS138574Melamine,99%;三聚氰胺1g￥100108-78-15g￥120FDA-PROP-001-SETFDA-GC-MS-ScreenforMelamine,Ammeline,AmmelideandCyanuricAcid&diams;Melamine,1000&micro;g/mLinDiethylamine/Water（1mL）&diams;Ammeline,1000&micro;g/mLinDiethylamin

檢測(cè)方法利用酶聯(lián)**吸附測(cè)定法用食品及飼料中三聚氰胺的定量測(cè)定。檢測(cè)原理酶聯(lián)**吸附測(cè)定法定量測(cè)定三聚氰胺殘留。利用萃取液通過均質(zhì)及振蕩的方式提取樣品中的三聚氰胺進(jìn)行**測(cè)定。先將三聚氰胺酶標(biāo)記物，樣品萃取物及標(biāo)準(zhǔn)加入到已經(jīng)包被有三聚氰胺抗體的微孔中開始反應(yīng)。在30分鐘的孵育過程中，樣品萃取物中的三聚氰胺與三聚氰胺酶標(biāo)記物競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合微孔中的三聚氰胺抗體，孵育30分鐘后洗掉小孔中所有沒有結(jié)合的三聚氰胺及三聚氰胺酶標(biāo)記物。在用去離子水清洗結(jié)束后，每孔中加入清澈的底物溶液，結(jié)合的酶標(biāo)記物將無色的底物轉(zhuǎn)化為藍(lán)色的物質(zhì)。孵育30分鐘后停止此反應(yīng)，根據(jù)各孔顏色深淺進(jìn)行數(shù)據(jù)讀取。依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的顏色得出樣品中三聚氰胺的的濃度值。實(shí)驗(yàn)所需設(shè)備及材料三聚氰胺檢測(cè)試劑盒(目前常用進(jìn)口試劑有美國(guó)Abraxis公司和美國(guó)Beacon公司的)酶標(biāo)儀一臺(tái)(配有450nm濾光片)1-5ml可調(diào)移液器100-1000ul可調(diào)移液器.20-200ul可調(diào)移液器.蒸餾水或去離子水..可吸取50ul的移液器及吸頭.可吸取50ul和100ul的八道移液器及吸頭.吸水紙或相當(dāng)?shù)奈牧?450nm的酶標(biāo)儀.計(jì)時(shí)器.洗瓶混旋器.20mM

1.概述此試劑盒的原理是酶聯(lián)**測(cè)定法，這個(gè)試劑盒可用于一切樣品中三聚氰胺的定性或定量檢測(cè)。如果需要進(jìn)一步測(cè)定可以利用HPLC,GC/MS技術(shù)。2.**指導(dǎo)試劑盒標(biāo)準(zhǔn)中含有少量的三聚氰胺，另外，底物溶液中含有四甲基聯(lián)苯胺，終止液里含有稀釋的鹽酸。盡量避免不要和這些試劑接觸，如果這些試劑接觸到皮膚請(qǐng)馬上用水沖洗。3.存儲(chǔ)和穩(wěn)定性試劑盒應(yīng)在4&ndash;8℃保存，在使用前試劑盒內(nèi)的所有試劑都要回溫到室溫(20-25℃)在有效期內(nèi)試劑可以一直使用4.原理酶聯(lián)**吸附測(cè)定法定量測(cè)定三聚氰胺殘留。將標(biāo)準(zhǔn)、樣品提取物和三聚氰胺酶標(biāo)記物加入到已經(jīng)包被有三聚氰胺抗體的微孔中開始反應(yīng)。在30分鐘的孵育過程中，樣品萃取物中的三聚氰胺與三聚氰胺酶標(biāo)記物競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合微孔中的三聚氰胺抗體，孵育30分鐘后洗掉微孔中所有沒有結(jié)合的三聚氰胺及三聚氰胺酶標(biāo)記物。在用稀釋的洗液清洗結(jié)束后，每孔中加入清澈的底物溶液，結(jié)合的酶標(biāo)記物將無色的底物轉(zhuǎn)化為藍(lán)色的物質(zhì)。孵育20分鐘后停止此反應(yīng)，根據(jù)各孔顏色深淺進(jìn)行數(shù)據(jù)讀取。依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的顏色得出樣品中三聚氰胺的的濃度值。5.局限性我們已經(jīng)對(duì)可能出現(xiàn)在檢測(cè)樣品中的很多有機(jī)和無機(jī)物做了檢測(cè)，

目標(biāo)通過簡(jiǎn)便快捷的技術(shù)，使用*少的樣品，在不使用色譜分離的條件下有效檢測(cè)各類乳制品中潛在的三聚氰胺。背景三聚氰胺的商業(yè)用途包括白木板、地板磚、廚具、防火纖維以及濾器。2007年3月，在用于制造寵物食品的麥芽糖漿和大米蛋白精中發(fā)現(xiàn)了三聚氰胺，導(dǎo)致了大批寵物貓狗因腎衰死亡。08年9月發(fā)生了牛奶、嬰兒奶粉、奶制品摻雜三聚氰胺的全球恐慌，中國(guó)報(bào)告了約300000例患者，6例嬰兒死于腎結(jié)石和其他腎損傷。為什么會(huì)發(fā)生這些問題?向動(dòng)物飼料中添加三聚氰胺是已被接受的長(zhǎng)期做法，三聚氰胺可通過常規(guī)蛋白質(zhì)測(cè)試，不被檢出，且可提高凱氏定氮法檢測(cè)食品蛋白質(zhì)含量的結(jié)果。而這*后可提高利潤(rùn)，而大宗奶制品行業(yè)的邊際利潤(rùn)是很小的，這種手段簡(jiǎn)便低廉，且法規(guī)對(duì)其限制很松。每個(gè)樣品耗時(shí)小于2.5分鐘，ASAP與ACQUITYTQD共同使用可快速篩查各類樣品中法規(guī)規(guī)定的三聚氰胺水平。全球反響對(duì)于**水平和須測(cè)試的產(chǎn)品類別，各地的反應(yīng)快速但有所不同。■美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局和歐洲食品**'>食品**局準(zhǔn)許的每日攝入分別為0.63以及0.5mg/kg體重?！鰢?guó)際上該限值具有不同的水平■香港：食品中=2.5mg/kg，嬰兒奶粉中=1

檢測(cè)方法GC-MS法測(cè)定動(dòng)物食品中的三聚氰胺Spectra-Quad實(shí)現(xiàn)三聚氰胺含量在線檢測(cè)超高效液相色譜_電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定飼料中殘留的三聚氰胺反相高效液相色譜法測(cè)定飼料中三聚氰胺的含量高效液相色譜-二極管陣列法測(cè)定高蛋白食品中的三聚氰胺高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定飼料中三聚氰胺的含量高效液相色譜-四極桿質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定飼料中三聚氰胺含量固相萃取與高效液相色譜聯(lián)用測(cè)定寵物食品中三聚氰胺液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MSMS)分析寵物食品中三聚氰胺液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定飼料中三聚氰胺殘留GC-MS法測(cè)定動(dòng)物食品中的三聚氰胺附：三聚氰胺檢測(cè)方法示例儀器與條件高效液相色譜儀;二極管陣列檢測(cè)器(DAD)，檢測(cè)波長(zhǎng)240nm，柱溫：40℃。(1)AgelaVenusilTMASBC18(4.6&times;250mm);緩沖液：10mM檸檬酸,10mM庚烷磺酸鈉;流動(dòng)相：緩沖溶液:乙腈=85:15;流速：1.0mL/min。(2)AgelaVenusilTMASBC8(4.6&times;250mm);流動(dòng)相：緩沖液：乙腈=85：15;緩沖液：10mM檸檬酸，10mM辛烷磺酸鈉，調(diào)pH為3.0;

食品中三聚氰胺的污染事件是近來社會(huì)關(guān)注的熱點(diǎn)。從去年出口美國(guó)的寵物飼料中被檢測(cè)出三聚氰胺到現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)我國(guó)幾十種品牌的奶制品均受三聚氰胺的污染。無不引起人們對(duì)食品**的擔(dān)擾，也引發(fā)了一股開發(fā)研究三聚氰胺檢測(cè)方法的熱潮。三聚氰胺是一種重要的氮雜環(huán)有機(jī)化工原料，水溶液顯弱堿性，能溶于甲醇、乙酸等，微溶于水和乙醇，不溶于乙醚、苯等，而且在傳統(tǒng)C&shy;18柱上保留很差。利用此特性，人們普遍采用離子對(duì)試劑液相色譜法和液質(zhì)聯(lián)用方法進(jìn)行檢測(cè)。但由于食品基質(zhì)復(fù)雜，使得樣品的前處理甚為關(guān)鍵。我們采用三***提取，MCX固相萃取小柱凈化，輔以J2加壓固相萃取儀操作，建立一套快速、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性良好的樣品外理方法。1.材料與方法1.1主要儀器與試劑：AgilentHP1100高效液相色譜儀、配四元梯度泵、在線真空脫氣機(jī)、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、二極管陣列檢測(cè)器、J2SCIENTIFIC(綠綿巨貿(mào))公司加壓固相萃取儀、超聲波清洗器、離心機(jī)、固相萃取小柱：OASISMCX，6mL，500mg。三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品，純度99%。1.2樣品處理1.2.1提取準(zhǔn)確稱取經(jīng)粉碎混勻后樣品5.0g，加入50mL1%三***溶液及2mL

4月1日，美國(guó)研究人員報(bào)告說，他們開發(fā)出一種簡(jiǎn)單、方便的新方法，可在短時(shí)間內(nèi)檢測(cè)出牛奶中是否含有三聚氰胺。美國(guó)邁阿密大學(xué)、西北大學(xué)和加州大學(xué)洛杉磯分校等機(jī)構(gòu)的研究人員月報(bào)告說，他們先將鹽酸注入牛奶中，沉淀出酪蛋白，以防止其干擾對(duì)三聚氰胺的檢測(cè)。然后在牛奶溶液中加入金納米粒子，這種粒子在溶液中彼此距離較遠(yuǎn)時(shí)，溶液呈紅色；距離變近時(shí)，溶液呈藍(lán)色。研究人員指出，三聚氰胺可以改變金納米粒子的排列距離，從而導(dǎo)致溶液顏色發(fā)生變化。因此，如果加入金納米粒子后溶液顏色改變，就說明其中可能含有三聚氰胺。為保證準(zhǔn)確性，研究人員隨后往溶液里加入氰尿酸，后者與三聚氰胺發(fā)生反應(yīng)后會(huì)形成肉眼可見的沉淀物。研究人員介紹說，利用這種新方法，可在不超過15分鐘時(shí)間內(nèi)檢測(cè)出牛奶中所含三聚氰胺。相關(guān)研究成果已發(fā)表在美國(guó)《應(yīng)用物理通訊》雜志上。三聚氰胺是一種低毒化工原料，過量攝入會(huì)對(duì)泌尿系統(tǒng)產(chǎn)生危害。世界衛(wèi)生組織2008年將這一化學(xué)物質(zhì)每日可容忍攝入量設(shè)定為每公斤體重0．2毫克。您可能會(huì)對(duì)本公司的以下產(chǎn)品感興趣：定氮儀∣全自動(dòng)凱氏定氮儀∣索氏抽提器∣索氏抽提儀∣蛋白質(zhì)測(cè)定儀∣馬弗爐∣可見分光光度計(jì)∣紫外可見分光光度計(jì)∣火焰分

美國(guó)研究人員4月1日?qǐng)?bào)告說，他們開發(fā)出一種簡(jiǎn)單、方便的新方法，可在短時(shí)間內(nèi)檢測(cè)出牛奶中是否含有三聚氰胺。美國(guó)邁阿密大學(xué)、西北大學(xué)和加州大學(xué)洛杉磯分校等機(jī)構(gòu)的研究人員報(bào)告說，他們先將鹽酸注入牛奶中，沉淀出酪蛋白，以防止其干擾對(duì)三聚氰胺的檢測(cè)。然后在牛奶溶液中加入金納米粒子，這種粒子在溶液中彼此距離較遠(yuǎn)時(shí)，溶液呈紅色;距離變近時(shí)，溶液呈藍(lán)色。研究人員指出，三聚氰胺可以改變金納米粒子的排列距離，從而導(dǎo)致溶液顏色發(fā)生變化。因此，如果加入金納米粒子后溶液顏色改變，就說明其中可能含有三聚氰胺。為保證準(zhǔn)確性，研究人員隨后往溶液里加入氰尿酸，后者與三聚氰胺發(fā)生反應(yīng)后會(huì)形成肉眼可見的沉淀物。研究人員介紹說，利用這種新方法，可在不超過15分鐘時(shí)間內(nèi)檢測(cè)出牛奶中所含三聚氰胺。相關(guān)研究成果已發(fā)表在美國(guó)《應(yīng)用物理通訊》雜志上。三聚氰胺是一種低毒化工原料，過量攝入會(huì)對(duì)泌尿系統(tǒng)產(chǎn)生危害。世界衛(wèi)生組織2008年將這一化學(xué)物質(zhì)每日可容忍攝入量設(shè)定為每公斤體重0.2毫克。

記者22日從黑龍江省衛(wèi)生廳獲悉，由黑龍江省**控制中心專家新近完成的一項(xiàng)科研課題，在國(guó)內(nèi)外**系統(tǒng)地揭示了三聚氰胺引發(fā)動(dòng)物腎損傷的發(fā)病機(jī)理、病變特點(diǎn)、腎臟結(jié)晶體形成的條件。研究結(jié)果為相關(guān)部門對(duì)三聚氰胺風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、制定食品和飼料中三聚氰胺的**管理限量值提供了重要科學(xué)依據(jù)。該成果近日獲得2009年度黑龍江省醫(yī)藥衛(wèi)生科技進(jìn)步一等獎(jiǎng)。因三聚氰胺并非食品添加劑，國(guó)內(nèi)外對(duì)三聚氰胺毒性研究資料掌握甚少，對(duì)三聚氰胺所造成腎損傷的量效關(guān)系、結(jié)晶體與腎臟病理損傷的關(guān)鍵環(huán)節(jié)等問題也缺乏深入探討。據(jù)此，黑龍江省**控制中心毒理所主任醫(yī)師王玉燕等**成功建立三聚氰胺在腎臟形成結(jié)晶的大鼠動(dòng)物模型，重現(xiàn)了這一**的病變過程。該模型方法科學(xué)先進(jìn)，有可重復(fù)性。研究結(jié)果揭示腎臟為三聚氰胺的毒作用靶器官。其發(fā)生機(jī)理是三聚氰胺在胃內(nèi)由胃酸催化水解生成三聚氰酸，兩者在腎臟再結(jié)合形成三聚氰胺&mdash;三聚氰酸結(jié)合晶體，晶體充滿腎小管，使腎臟體積增大、重量增加，因管壁的擠壓作用而使腎組織嚴(yán)重缺血，導(dǎo)致腎臟呈現(xiàn)出特征性土黃色沙石樣的外觀。觀察結(jié)果還表明，三聚氰胺結(jié)晶體還可導(dǎo)致腎臟炎癥反應(yīng)和纖維組織增生等病理改變，進(jìn)一步引發(fā)腎臟代

用安捷倫液相色譜儀Agilent1200分析三聚氰胺三鹿事件&rdquo;再次敲響了食品**的警鐘，也引起全社會(huì)廣泛關(guān)注。安捷倫儀器有限公司結(jié)合多年液相色譜儀和色譜柱研制、開發(fā)及應(yīng)用的經(jīng)驗(yàn)，利用*新研制的1200液相色譜儀和全新開發(fā)的Elite-MSP專用分析柱，不僅對(duì)三聚氰胺有很好的保留，獲得**的峰形，而且能有效分離樣品中可能存在的干擾物質(zhì)。該方法準(zhǔn)確性好、靈敏度高、線性范圍寬、性能穩(wěn)定、易于推廣，投資省。配套采用安捷倫分析儀器有限公司的P系列等度紫外檢測(cè)系統(tǒng)，并輔助DAD光譜定性功能，能用*低的投入準(zhǔn)確完成三聚氰胺樣品的定性及定量分析。色譜條件（農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)）色譜柱：EliteMSP5&micro;m,ID4.6mm&times;250mm流動(dòng)相：乙腈/緩沖液，10/90(緩沖液中含10mM檸檬酸，10mM庚烷磺酸鈉)流量：1.0mL/min檢測(cè)波長(zhǎng)：UV240nm進(jìn)樣量：10&micro;L柱溫：40℃注：奶粉樣品及標(biāo)準(zhǔn)品均取自大連市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所。液相色譜儀儀器配置項(xiàng)目?jī)x器名稱數(shù)量11200四元高壓恒流泵1臺(tái)2紫外可見波長(zhǎng)檢測(cè)器1臺(tái)3高壓進(jìn)樣閥1只4色譜數(shù)據(jù)處理工作站1套5