代做實驗-HE染色石蠟切片制作的基本過程
產(chǎn)品簡介
代做實驗-HE染色石蠟切片制作的基本過程:HE染色取材與固定 從人或動物新鮮尸體上取下組織塊(一般厚度不超過0.5厘米)投入預先配好的固定液中(10%福爾馬林,Bouin氏固定液等)使組織、細胞的蛋白質(zhì)變性凝固,以防止細胞死后的自溶或**的分解,從而保持細胞本來的形態(tài)結構。
產(chǎn)品詳細信息
代做實驗-HE染色石蠟切片制作的基本過程
1、HE染色取材與固定
從人或動物新鮮尸體上取下組織塊(一般厚度不超過0.5厘米)投入預先配好的固定液中(10%福爾馬林,Bouin氏固定液等)使組織、細胞的蛋白質(zhì)變性凝固,以防止細胞死后的自溶或**的分解,從而保持細胞本來的形態(tài)結構。
2、HE染色脫水透明
一般用由低濃度到高濃度酒精作脫水劑,逐漸脫去組織塊中的水份。再將組織塊置于既溶于酒精,又溶于石蠟的透明劑二甲苯中透明,以二甲苯替換出組織塊的中酒精,才能浸蠟包埋。
3、HE染色浸蠟包埋
將已透明的組織塊置于已溶化的石蠟中,放入溶蠟箱保溫。待石蠟完全浸入組織塊后進行包埋:先制備好容器(如折疊一小紙盒),倒入已溶化的石蠟,迅速夾取已浸透石蠟的組織塊放入其中。冷卻凝固成塊即成。包埋好的組織塊變硬,才能在切片機上切成很薄的切片。
4、HE染色切片與貼片
將包埋好的蠟塊固定于切片機上,切成薄片,一般為5—8微米厚。切下的薄片往往皺折,要放到加熱的水中燙平,再貼到載玻片上,放45℃恒溫箱中烘干。
5、HE染色脫蠟染色
常用HE染色,以增加組織細胞結構各部分的色彩差異,利于觀察。蘇木精(Hematoxylin,H)是一種堿性染料,可將細胞核和細胞內(nèi)核糖體染成藍紫色,被堿性染料染色的結構具有嗜堿性。伊紅(Eosin,E)是一種酸性染料,能將細胞質(zhì)染成紅色或淡紅色,被酸性染料染色的結構具有嗜酸性。染色前,須用二甲苯脫去切片中的石蠟,再經(jīng)由高濃度到低濃度酒精,*后入蒸餾水,就可染色。
HE染色過程是:
①將已入蒸餾水后的切片放入蘇木精水溶液中染色數(shù)分鐘。
②酸水及氨水中分色,各數(shù)秒鐘。
?、哿魉疀_洗1小時后入蒸餾水片刻。
?、苋?0%和90%酒精中脫水各10分鐘。
?、萑刖凭良t染色液染色2~3分鐘。
6、脫水透明
染色后的切片經(jīng)純酒精脫水,再經(jīng)二甲苯使切片透明。
7、封固
將已透明的切片滴上加拿大樹膠,蓋上蓋玻片封固。待樹膠略干后,貼上標箋,切片標本就可使用。
上海拜沃生物科技有限公司專業(yè)實驗外包-HE染色服務,詳情請咨詢。
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