抑制性消減雜交文庫技術(shù)SSH是一項(xiàng)可以快速獲取兩個(gè)不同生物材料中差異表達(dá)基因的分子生物學(xué)技術(shù)，是快速篩選差異表達(dá)基因的有效方法，也是尋找新基因的重要手段。該技術(shù)尤其適合以genome尚不完全清晰的物種或者以特殊材料為研究對象的科研工作者。是基因芯片技術(shù)的有效補(bǔ)充。

基本流程:通過差減文庫構(gòu)建，文庫驗(yàn)證和篩選（逆向斑點(diǎn)雜交），獲得陽性克隆，對陽性克隆測序及生物信息分析，可判定差異基因的情況。另外結(jié)合RACE技術(shù)可進(jìn)一步克隆所獲得的差異基因的cDNA全長序列，并可用Northern blot 或Real－Time PCR加以驗(yàn)證。

 

 

是一種**性的差異表達(dá)基因篩選技術(shù)。該方法結(jié)合了抑制性PCR和消減雜交技術(shù)，即御用PCR反應(yīng)鏈內(nèi)退火有限于鏈間退火的特點(diǎn)和分子雜交二級動力學(xué)原理，經(jīng)過體系不斷優(yōu)化建立起來的快捷、有效的差異基因篩選方法。與傳統(tǒng)的DD—PCR、SAGE及cDNA—RNA等技術(shù)相比，具有低豐度mRNA富集效率高、假陽性低、靈敏度高重復(fù)性好等特點(diǎn)。現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于動植物發(fā)育和分化、**易感性差異、抗藥性差異和組織（病理和正常樣本）差異及微生物基因分型差異的研究。

 

技術(shù)方法成熟有效

 

不需要利用傳統(tǒng)的物理方法對單鏈、雙鏈cDNA進(jìn)行分離。只要目的序列存在，就能進(jìn)行指數(shù)擴(kuò)增，篩選出差異基因片段。

 

放大稀有轉(zhuǎn)錄本

 

本技術(shù)在同一操作下完成轉(zhuǎn)錄本豐度平衡和差減，在我們的模型實(shí)驗(yàn)中，稀有轉(zhuǎn)錄本至少被放大了5000倍，也就是說，利用本及時(shí)可以極大地增加獲得表達(dá)差異地稀有轉(zhuǎn)錄本地可能性。

 

僅僅需要500ng的poly A＋ RNA

 

與其他的消減雜交方法不同，應(yīng)用抑制性消減雜交技術(shù)只需要0.5－2的poly A+ RNA即可進(jìn)行有效實(shí)驗(yàn)。如果您只有極少量（50ng-100ng）的總RNA，我們可以通過poly A＋ RNA的高保真線性放大技術(shù)來合成足量的cDNA來進(jìn)行抑制性消減雜交實(shí)驗(yàn)。

 

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